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可以用质粒DNA抽提试剂来提取基因组DNA吗?

 基因组DNA的抽提,一般不会用到质粒抽提的试剂盒,究其原因是由于两者的原理完全不同。两者不都是DNA抽提么?其实关键在于这两者在实验的初始设计上就完全不同。先给大家解释一下质粒抽提吧。 ?? ?质粒抽提  质粒抽提通常用的是碱裂解法,一般的试剂盒都会有Solution I,Solution II,Solution III,有的还会有SolutionIV,然后是过柱子。 ?? ?Solution I一般都是用来重悬菌液的,会加入RNase I,降解掉里面大肠杆菌的RNA。同时里面还会用Tris...

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C型凝集素受体Dectin-2和Dectin-3的单克隆抗体制备

原文作者:关建洪? 朱乐乐? 林欣? 贾鑫明 文章来源:《同济大学学报(医学版)》 2014年02期 C型凝集素受体(C-type lectin receptor,CLR)是一类模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR),可以识别病原体细胞壁上的糖成分,在抗真菌免疫中发挥重要作用。Dectin-2(dendritic cell associated C-type lectin-2)和Dectin-3(dendritic cell associated C-t...

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EV71结构蛋白VP0的表达及抗体的制备

手足口病(Hand,foot,and mouth disease,HFMD)是一种地方流行病,主要发病人群为儿童,重症患者可表现为脑炎,无菌性脑膜炎等多种与神经相关的疾病。手足口病的其中一种主要 的病原体是肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71),1969年在美国加利福尼亚首次分离出EV71,它是小RNA病毒病毒科的一员,无包膜,其基因组为一条大小约为7.4kb的正义单链 RNA。EV71型病毒基因组编码四个结构蛋白,分别为VP1、VP2、VP3、和VP4,构成原聚体,该原聚体再...

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DNA甲基化与衰老研究进展综述

DNA甲基化是一类基因组核酸序列未改变的功能性修饰,它是一种常见的表观遗传学现象。在过去的几十年中,人们对于产生DNA甲基化的各种遗传和环境因素及其生物学效应已经进行了广泛而深入的研究。继人类基因组计划结束后,于2003年,人类表观基因组协会(Human Epigenome Consortium,HEC)启动人类表观基因组计划(human epigenome project,HEP),旨在识别和分类人类基因组中甲基化变异位点(methylation variable positions,MVP...

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抗体公司如何选择?知名抗体公司有哪些?

选择多克隆抗体还是单克隆抗体? 一般来说,多抗识别的表位多,即使Target抗原有些表位被破坏,它仍然可以被多抗识 别,但是对于单抗来说就需要很小心了,因为它所识别的那一个表位被遮盖或被修饰时很可能不能与它对应的单抗反应,所以从这个角度来看,多抗是一个比较保险 的选择。但是单抗也有独到的地方,例如它更容易实验特异性,尤其是家族成员结构类似的时候,特异的单抗可以将它们分开。单抗的另一个优点就是容易实现批次 的稳定性,这个对于将来需要长期研究一个特定的target的朋友非常重要,比如某个抗体可以识...

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猪磷酸酪氨酸互作结构域1基因的融合表达及其多克隆抗体的制备

摘要:本文旨在通过原核表达获得猪磷酸酪氨酸互作结构域1(pPID1)重组蛋白,并制备pPID1多克隆抗体。将pPID1基因插入pET28a(+),构建重组pET28a(+)-pPID1大肠杆菌表达质粒,然后将重组质粒pET28a(+)-pPID1转化到大肠杆菌BL21感受态细胞中,获得的重组子以不同异丙基硫代--D-半乳糖苷(IPTG)浓度、温度和时间诱导,确定pPID1融合蛋白表达的最适条件。将表达产物经镍离子-亚氨基二乙酸(Ni2+-IDA)亲和层析纯化后进行基质辅助激光解析电离飞行时间质...

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Znf230多克隆抗体的制备及其在小鼠组织中的表达

【摘要】 目的 通过获得小鼠Znf230多克隆抗体,对Znf230在小鼠组织中的表达及定位进行研究。方法 扩增小鼠Znf230基因与原核表达载体pGEX-5X-3重组,诱导得到GST-Znf230融合蛋白,纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,通过Western blot和免疫组织化学方法研究Znf230在小鼠组织中的表达及定位情况。结果 Znf230多克隆抗体具有较高的特异性,Znf230在小鼠多种组织中均有表达,在脾脏和脑组织中表达量较高,该蛋白在肝细胞、脾细胞、肺支气管上皮细胞细胞核中表...

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抑制T细胞增殖的抗CD45单克隆抗体的制备

目的 寻找能调节T细胞功能的相关分子,进行与T细胞介导的自身免疫性疾病相关的研究。方法从BALB/c小鼠骨髓中收集树突状细胞,免疫Wistar大鼠,进行细胞融合,建立杂交瘤细胞系。筛选得到很多株能调节T细胞功能的杂交瘤细胞系,对其中一株最能抑制T细胞增殖的杂交瘤细胞系进行了进一步的深入研究。结果 显示其目标分子是CD45,同时增殖实验结果显示该抗体能显著抑制T细胞增殖反应。结论 抗CD45单克隆抗体能有效抑制T细胞增殖,有望将本抗体用于T细胞介导的自身免疫性疾病的相关预防及治疗中。 CD45,又...

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全面解析CRISPR/Cas 基因组靶向编辑技术

?????? CRISPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas(CRISPR-associated)系统是一种原核生物特有的针对外源性遗传物质免疫系统,通过序列特异的RNA 介导,切割降解外源性DNA,这些外源性遗传物质包括噬菌体或者外源性质粒。CRISPR/Cas 系统可分为三种类型,其中类型Ⅱ CRISPR/Cas 系统由于其组成简单,被改造成为基因组靶向编辑的工具。在类型Ⅱ CRISPR/Cas 系...

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LncRNA的研究进展(肌肉发育相关)

?????? 2010 年之前,基因表达调控的研究主要集中在转录因子介导的基因转录调控,尤其是与编码蛋白质的基因,它们约占整个基因组的2%。RNA 一度被认为是DNA 和蛋白质之间的“过渡”,但越来越多的证据表明,RNA 在生命进程中扮演的角色远比人们设想的多。最近发现的长链非编码RNA(long noncodingRNA,LncRNA)和小分子非编码RNA(small noncoding RNA),包括piRNA(piwi-interacting RNA),hsRNA(heterochrom...

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