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α-乳白蛋白单克隆抗体的制备及斑点印迹定性检测方法的建立

牛乳及其乳制品中含有丰富的营养成分,是人们摄取蛋白质的重要来源;同时,牛乳又是主要的过敏食物之一。其中,牛乳中alpha-乳白蛋白与人乳alpha-乳白蛋 白的氨基酸残基有很高的相似度,对初生婴儿来说是一种很重要的蛋白质来源,但该蛋白又被认为是牛乳中主要的过敏原之一。据报道,超过19%的牛乳过敏均是 由alpha-乳白蛋白引起。因此,开展针对食品中alpha-乳白蛋白的检测研究具有重要的理论和现实意义。 目前,用于过敏原检测的主要方法为酶联免疫吸附法(ELISA),该法具有高的灵敏度,但检测步...

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A群猪轮状病毒VP7蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

轮状病毒是世界范围内引起婴幼儿及多种幼畜急性腹泻的一个重要病原体。仔猪轮状病毒性腹泻是由轮状病毒引起的一种以厌食、呕吐、腹泻、脱水为特征的 传染病,导致仔猪死亡率升高或生长缓慢,给养猪业带来巨大经济损失。轮状病毒属于呼肠孤病毒科、轮状病毒属,可分为A~G 7个群,感染幼畜的轮状病毒多为A群。完整的病毒粒子表面光滑,无脂蛋白囊膜,含有完整外壳的实心光滑型颗粒,65~80nm,实心颗粒具有传染性。病毒 体核心由11段不连续的双股RNA组成,编码6个结构蛋白和6个非结构蛋白。VP7蛋白由基因片段...

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HA蛋白多肽抗体的设计、制备与鉴定

牛皮蝇蛆病是由牛皮蝇寄生于牦牛或黄牛体内引起的一种家畜寄生虫病,牛只感染后可使产奶量和产肉量降低,牛皮穿孔,给养牛业带来巨大的经济损失。研 究发现,纹皮蝇和牛皮蝇幼虫能在宿主组织中移行8个月,其分泌的四种丝氨酸蛋白酶―皮蝇素,起免疫抑制作用,以致宿主不能用免疫机能杀死蝇的幼虫。皮蝇素 A(HyderminA,HA)是牛皮蝇一期幼虫在宿主体内游行时分泌的一种丝氨酸蛋白酶。皮蝇素A具有抗炎、抑制补体反应等功能。 据研究报道,HA调节宿主免疫功能有下列3种机制:HA抑制IL-10生成,从而...

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Class I新城疫病毒NP重组蛋白的表达及广谱性NDV单克隆抗体的制备

新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)强毒株引起的一种急性、烈性、高度接触传染性禽传染病,严重危害世界养禽业的健康发展。NDV是副黏病毒科 (Paramyxoviridae)、禽腮腺炎病毒属(Avulavirus)的唯一成员,其基因组为不分节段的单股负链线性RNA。按照3'- Leader-NP-P-M-F-HN-L-Trailer-5'的顺序,NDV依次编码核衣壳蛋白(NP)、磷蛋白(P)、基质蛋白(M)、融合...

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11型HPVE7蛋白的表达及其多克隆抗体的制备

人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)是一种双链DNA病毒,约有200余种亚型。根据病毒的基因组结构、生物学特性和致病性,可分为五大类,即α、β、γ、μ和ν,6型 和11型HPV是低危型,属于α乳头瘤病毒,超过90%的生殖器疣是由此类HPV引发的。11型HPV主要感染鳞状上皮,导致上皮增生,引起各种皮肤疣和 黏膜乳头瘤。HPV11E7基因全长297bp,编码的HPV11E7蛋白含98个氨基酸,相对分子质量(Mr)约为10800。HPV11E7蛋白定位 于细胞核,其C...

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ASPP1蛋白抗体制备及ASPP1在结肠癌组织中的表达

P53凋亡刺激蛋白(apoptosis stimulating protein of P53,AS-PP)家族是新近发现的与P53有关的肿瘤抑制基因家族。研究此蛋白如何促进肿瘤细胞凋亡已成为当今热点话题。现己发现了该基因家族的3个 成员:ASPP1、ASPP2和iASPP。对ASPP的调控机制需要进一步探讨。通过抑制iASPP或激活ASPP来提高P53诱导细胞凋亡的功能。本 研究根据生物信息学软件分析人ASPP1蛋白的二级结构、亲水性、疏水性和抗原性等理化性质,经同源性检索,综合考虑抗体设计的其...

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β-内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备

目前,在我国奶牛养殖业中,penicillin和头孢菌素等β-内酰胺类抗生素对奶牛乳房炎等疾病的控制起着十分重要的作用。由于一些奶牛养殖商 户滥用抗生素以及未严格遵守休药期,致使牛奶中抗生素残留超标,乳中残留的抗生素严重危害食品安全和人体健康。我国政府对超过一定限量抗生素的原料乳实施 标准控制。国内多数乳品企业对抗生素残留超标的牛乳采取降价收购或不收购,而一些不法奶站使用一些生物制剂降解牛乳中残留的抗生素,生产出人造"无抗 奶"。经过调研,初步判断市售生物制剂的主要成分是β-内酰胺酶,它是由革兰...

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常见的肿瘤markers有哪些?

增殖markers 促增殖:Ki67, ERK1/2, p38, JNK, AKT, PCNA, p70S6K细胞周期markers G0/G1期:CDK4, CDK6, Cyclin D; CDK2,Cyclin E G2/M期:phospho-p53, p53, p21, p27,cyclin B1, phosphor-cdc2, cdc2, phospho-cdc25c, cdc25c CDK4,CDK6, Cyclin D1促G1进展;CDK2, Cyclin E促G1-S过渡;CDC2...

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热点剖析:mTOR信号通路&自噬

一、自噬过程:根据胞内底物运送到溶酶体的方式不同,哺乳动物细胞自噬可分为三种主要方式:巨自噬(Macroautophagy),微自噬(Microautophagy)和分子伴侣介导的自噬(Chaperone-mediatedautophagy)。  通常我们研究的是巨自噬,包括:信号刺激,吞噬泡的形成,吞噬泡与内含体/溶酶体的融合,内容物的降解以及降解产物的释放。一方面,在正常条件下,mTOR高磷酸化Atg13抑制其活性。而mTOR的抑制信号,导致Atg13去磷酸化,形成ULK1(Atg1)-A...

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基因敲除技术汇总

“自杀质粒”(suicide plasmid) ?  这是最早的敲除方法,也就是通过同源整合的方式定点将基因敲除的方法。 ?  原理:自杀质粒通常为R质粒的衍生质粒,常有宿主范围广的特点,具有接合转移基因。它的复制需要一种特殊的蛋白,大多数细菌不产生这种蛋白质,因此,当进入寄主细胞时,要么不能复制,被消除,要么被整合入染色体上,和染色体一起复制。 ? ?    利用自杀质粒的这个特点,将基因工程技术构建的基因缺失的DNA片断,克隆入自杀质粒,利用缺失基因两端的同源片断,定位自杀质粒的整合位点。利...

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