纽普生物

重组抗体表达纯化服务

服务概览

从目前的趋势推断,未来抗体及抗体衍生物分子将占据生物治疗药物的1/3以上。用于治疗用途的单抗药物的生产将会是表达系统的开发及优化的主要驱动力。市场上绝大多数的全长单抗都是用哺乳动物细胞生产的,主要是CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)或者CHO衍生的工程细胞。重组抗体表达平台,包括原核表达系统和哺乳动物细胞表达系统。


原核表达系统

细菌表达系统非常适合用于表达单链抗体scFv,Fab和人工小型抗体,可以表达在细胞内、周质腔及分泌到胞外。

蛋白质的一级序列非常大的程度上决定了它能否在大肠杆菌中正确的折叠及保持活性。重组抗体的表达通常是通过在N端融合信号肽,使得蛋白能分泌到大肠杆菌的周质腔,在那里,分子伴侣(Skp,FkpA,DsbA,DsbC)可以辅助Ig结构域的折叠和形成正确的二硫键来稳定结构。

注:尽管如此,用原核表达系统来表达抗体往往会存在一些问题,不推荐使用。

哺乳动物细胞表达系统

保证型服务,不成功,不收费

丰富的抗体表达载体,您只需要提供重链及轻链可变区序列,就可以启动项目。

成熟的序列优化技术,配合HEK293改良细胞系,最大程度激发表达潜能,常规瞬时转染小试产量在10~100mg/L,只需要提供重链及轻链可变区序列,就可以启动项目。

服务流程

  1. 根据抗体亚型和应用要求,选择合适的表达载体。高效的分泌信号肽,能满足科研及工业级应用。
  2. 转染级别的质粒制备
  3. 抗体表达测试及条件优化:包括细胞系选择,HEK293/CHO;转染条件优化
  4. 抗体纯化,根据Fc信息选择Protein A/G进行纯化
  5. 质量检测:SDS-PAGE + Western Blot
  6. 交付标准:纯度>90%; 指定量的重组抗体
  7. 时间周期:5-8周(从基因合成开始)