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多肽合成流程


多肽价格计算工具(Pepbox)

Pepbox使用说明

多肽序列输入框中不需要包含N端和C端修饰,不然结果可能有误。

多肽序列请输入氨基酸单字母缩写,对于非常见氨基酸或者修饰性氨基酸,请使用三字母的缩写并用大括号{}括起。比如:D-苯丙氨酸写成{D-Phe}、磷酸化的丝氨酸{pSer}、磷酸化的D-丝氨酸{D-pSer}、甲基化的精氨酸{Arg(Me)}、甲基化的赖氨酸{Lys(Me)}、双甲基化的赖氨酸{Lys(Me2)}、三甲基化的赖氨酸{Lys(Me3)}等

Pepbox还处在初级阶段,如果Pepbox没能给出您想要的结果,请联系我们进行询价

建议纯度请参照:多肽纯度建议表

大规模订购或者特殊项目请:咨询技术顾问


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价格列表* 30个氨基酸以下多肽的氨基酸单价 (4 mg)
纯度 粗品 脱盐 >75% >85% >98%
单价 ¥19.58 ¥24.98 ¥42.53 ¥47.93 ¥68.85

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多肽标记和修饰

目前多肽标记及修饰的内容非常多,广泛应用在多肽药物,多肽生物学,多肽抗体以及多肽试剂的研究中。目前应用广泛的有:非放射性核素标记(C13,H2,N15),荧光标记(FAM,FITC等),生物素标记,磷酸化修饰等。

1. 非放射性核素标记

目前在非放射性核素标记中,使用广泛的仍然是C13,H2,因为其使用安全,放射性小。现在有比较完全的非放射性标记的氨基酸,可以按照正常的多肽合成方法将标记好的氨基酸直接连接到多肽上。

2. 荧光标记

荧光标记由于没有放射性,实验操作简单。因此,目前在生物学研究中荧光标记应用非常广泛,荧光标记方法与荧光试剂的结构有关系,对于有游离羧基的采用的方法与接肽反应相同,也采用HBTU/HOBt/DIEA方法连接。 在N端标记FITC的多肽需经历环化作用来形成荧光素,通常会伴有最后一个氨基酸的去除,但当有一个间隔器如氨基己酸,或者是通过非酸性环境将目的肽从树脂上切下来时,这种情况可避免。

3. 生物素标记

生物素-亲合素系统 (biotin-avidin system,BAS),是70年代后期应用于免疫学,并得到迅速发展的一种新型生物反应放大系统。由于它具有生物素与亲合素之间高度亲和力及多级放大效应,并与荧光素、酶、同位素等免疫标记技术有机地结合,使各种示踪免疫分析的特异性和灵敏度进一步提高。主要有用于标记多肽氨基的生物素N-羟基丁二酰亚胺酯(BNHS)和生物素对硝基酚酯(pBNP),其中以BNHS最常用,当然,也可以直接使用生物素也可以标记,因为其结构上有个游离的羧基,采用HBTU/HOBt/DIEA方法缩合,由于生物素的溶解度低,使用DMSO/DMF的混合溶剂增加溶解度。

4. 磷酸肽合成

磷酸肽在生命过程中发挥重要作用,磷酸化的位置在多肽上的Ser,Thr,Tyr。目前磷酸肽合成一般都采用磷酸化氨基酸,目前使用的都是单苄基磷酸化氨基酸。磷酸化氨基酸的连接一般采用HBTU/HOBt/DIEA方法,但是目前采用该方法合成磷酸化也有缺点,特别是在合成多磷酸化多肽或长肽的时候,连接效率低,最后产品纯度很低,对于这种磷酸化多肽,我们考虑采用后磷酸化方法,其合成过程就是在多肽合成结束后,选择性脱去要标记的氨基酸的侧链保护基,对于Tyr,Thr可以直接使用侧链不保护的氨基酸进行反应,而Ser可以采用Fmoc-Ser(trt),在1% TFA/DCM条件下可以定量的脱除。后磷酸化,采用双苄基亚磷酰胺,四氮唑生成亚磷酰胺四唑活性中间体,连接到羟基上,随后在过氧酸下氧化生成磷酰基,完成反应。

常用修饰和标记

N端标记或修饰

N端乙酰化(AC)

N端生物素标记(Biotin)

N端脂肪酸修饰(Pal, Myr)

N端罗丹明标记(Rodamine B)

N-FITC

N-5-FAM

N-BODIPY FL

N-Merocyanine 540

HYNIC

C端标记或修饰

C端酰胺化

C-端生物素标记 (用赖氨酸侧链连接)

C-FITC (用赖氨酸侧链连接)

C-AMC

C-AFC

磷酸化标记

p-Tyr

p-Ser

p-Thr

环化

二硫键环肽(S-S)

多肽首尾酰胺环

多肽蛋白偶联

KLH偶联

BSA偶联

含特殊氨基酸

D-amino acids

Cit,Aib,Abu,Ahx

Lys(Ac)

Lys(Me), Lys(Me2), Lys(Me3)

MAP 复合抗原肽

MAP4 4分支

MAP8 8分支

MAP16 16分支

+ Fatylation
  • Ac-
  • Acryl-
  • Alloc-
  • Allyl-
  • Br-Ac-
  • Br-Prp-
  • But-
  • Cl-Ac-
  • Dec-
  • F-Dec-
  • F-Lau-
  • F-Myr-
  • F-Oct-
  • For
  • Hex-
  • Iba-
  • Lau-
  • Myr-
  • Oct-
  • Pal-
  • Ste-
+ Fluorescence
  • 5(6)-TAMTA-
  • 5-FAM
  • 5-FAM-LC
  • Abz
  • Biotin
  • Biotin-LC
  • Cys(Npys)
  • DABCYL
  • Dansyl
  • Dansyl-LC
  • Fa- , 3-[2-2furyl]acrylic acid
  • FITC
  • FITC-LC
  • Lys(5,6-FAM)
  • Lys(5-FAM)
  • Lys(Biotin)
  • Lys(Dansyl)
  • Lys(FITC)
  • Lys(MCA)
  • Lys(TAMRA)
  • MCA
  • Orn(Bio)
  • Rhodamine B-
  • TAMRA
  • TAMRA-LC
+ PEG
  • Azido-PEG4-
  • mPEG2000
  • mPEG3000
  • mPEG5000
  • NH2-PEG2000-Suc-
  • PEG1900-
+ Glucose
  • Fructose-
  • Glucose-
+ General
  • 4-F-Bz-
  • Boc-
  • Bz-
  • CBZ-
  • Fmoc-
  • H-
  • MeO-Suc-
  • Mha-
  • Mpa-
  • SA-
  • SATA
  • SATP
  • Suc-
  • {Aoa}
  • Cholesteryl-
  • GAC-
  • HYNIC-
  • La-
  • Mal-
  • Mal-Acp-
  • N3-Acp
  • N3-Gly
  • Pyr-
+ Fluorescence
  • ED5-FAM
  • EDBiotin
  • EDDansyl
  • EDDnp
  • EDFITC
  • EDTAMRA
  • Glu(EDANS)-NH2
  • Lys(5-FAM)
  • Lys(Biotin)
  • Lys(Dansyl)
  • Lys(FITC)
  • Lys(LC-Biotin)
  • Lys(TAMRA)
  • -NH-PEG3-Bio
+ Amidation
  • -NHEt
  • -NH2
+ Ester
  • -Obzl
  • -Oet
  • -Ome
  • -OtBu
  • -TBzl
+ Thiol
  • -Cya
+ Alcohol
  • Alcohol
+ AMC
  • -AMC