采用两株识别不同表位的抗IL-8单克隆抗体，其中一株（4D7）作为包被抗体，以识别和结合待检标本中的IL-8，另一株作为酶标抗体，与结合于包被抗体的IL-8的另一个表位结合并催化底物显色。
1. 包被
pH9.5 碳酸盐缓液稀释4D7单克隆抗体粗提γ球蛋白至1 μg/ml，加入96
孔板，100 μl/孔，放4 ℃，36 小时。2. 封闭
0.1 ％吐温PBS（Buffer A）冲洗96孔板三次，加3 ％BSA Buffer A（Buffer B） 200 μl/孔，放37 ℃，1 小时。
3. 加待检样品
Buffer A 冲洗96孔板三次，加待检样品及Buffer B 稀释的标准品100 μl/ 孔，放37 ℃，3 小时。
4. 加酶标抗体
Buffer A冲洗96孔板五次，3 ％PEG Buffer A稀释酶标抗体至1∶800，加 入96孔板，100 μl/孔，放37 ℃，1 小时。
5. 显色
Buffer A冲洗96孔板五次，pH5.4柠檬酸缓冲液溶解底物（ABTS)），0.2 mg/ ml，加3 ％H 2 O 2 ，2 μl/ml，加入96孔板，100 μ/孔，室温下或37 ℃显色。
注意事项
1. 待检标本如为血清，应采用一次性容器，血液采集后尽快（6小时以内）分离血
清。
2. 封闭液或抗体稀释液应新鲜配制或冻存。
2014-12-12