pBiT2.1-RPN2(human) 载体 (V045683) GenBank图谱(.gb)

质粒编号

质粒名称

规格

价格

V045683

pBiT2.1-RPN2(human)

100 μg (转染级)

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。

所有的产品都严格仅供学术研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。

确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

载体名称:: pBiT2.1-RPN2(human)

载体抗性:: Ampicillin

Refseq ID:: NM_002951.5

载体长度:: 5323 bp

载体类型:: Protein expression

复制子:: ori

宿主:: Mammalian cells

拷贝数:: High

启动子:: TK

5'引物:: HSV TK-F1

感受态:: DH5a

培养温度:: 37℃

表达方法:: Transient

描述:: Homo sapiens ribophorin II (RPN2), transcript variant 1, mRNA

pBiT2.1-RPN2(human) 载体图谱

复制序列 NovoBuilder中查看图谱

质粒操作方法

1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

pBiT2.1-RPN2(human) 载体序列

LOCUS       pBiT2.1-RPN2(human)     5323 bp    DNA     circular SYN 01-JAN-1980
DEFINITION  synthetic circular DNA.
ACCESSION   V045683
VERSION     V045683
KEYWORDS    .
SOURCE      .
  ORGANISM  .
            .
FEATURES             Location/Qualifiers
     promoter        28..779
                     /note="herpes simplex virus thymidine kinase promoter"
                     /label="HSV TK promoter"
     CDS             863..2755
                     /label="RPN2(NM_002951)"
                     /note="RPN2(NM_002951)"
                     /gene="RPN2"
     polyA_signal    2877..2998
                     /note="SV40 polyadenylation signal"
                     /label="SV40 poly(A) signal"
     rep_origin      complement(3417..4005)
                     /direction=LEFT
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
                     replication"
                     /label="ori"
     CDS             complement(4205..5065)
                     /codon_start=1
                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                     related antibiotics"
                     /product="β-lactamase"
                     /transl_table=1
                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFA,HPETLVKVKDAEDQLGARVGY
                     IELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEY
                     SPVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDR
                     WEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRS
                     ALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGA
                     SLIKHW*"
                     /label="AmpR"
     polyA_signal    5170..5218
                     /note="synthetic polyadenylation signal"
                     /label="poly(A) signal"
     misc_feature    5232..5323
                     /note="RNA polymerase II transcriptional pause signal from
                     the human α2 globin gene"
                     /label="pause site"