我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供学术研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
Note:
- 载体名称:
- pFB-Neo-E-hA20
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 9033 bp
- 载体类型:
- Mammalian expression vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- De Schamphelaire W, Olbrechts A, Meert J, Verhelst K, Roggeman Fonseca M, Vanhoucke M, Beyaert R.
pFB-Neo-E-hA20 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pFB-Neo-E-hA20 载体序列
LOCUS V006294 9033 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Exported.
ACCESSION V006294
VERSION V006294
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 9033)
AUTHORS De Schamphelaire W, Olbrechts A, Meert J, Verhelst K, Roggeman
Fonseca M, Vanhoucke M, Beyaert R.
TITLE BCCM/LMBP Plasmid collection
JOURNAL Unpublished
REFERENCE 2 (bases 1 to 9033)
AUTHORS De Schamphelaire W.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (02-FEB-2017) BCCM/LMBP, Universiteit Gent,
Technologiepark 927, 9052, BELGIUM
REFERENCE 3 (bases 1 to 9033)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 9033)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName:
"Unpublished"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(02-FEB-2017) BCCM/LMBP, Universiteit Gent, Technologiepark 927,
9052, BELGIUM"
SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..9033
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
regulatory 169..760
/label="5' MMLV-LTR"
/note="5' MMLV-LTR"
/regulatory_class="promoter"
LTR 289..758
/note="long terminal repeat from Moloney murine leukemia
virus"
misc_feature 823..1180
/label="MMLV Psi"
/note="packaging signal of Moloney murine leukemia virus
(MMLV)"
CDS 1245..1661
/label="gag (truncated)"
/note="truncated Moloney murine leukemia virus (MMLV) gag
gene lacking the start codon"
misc_feature 1671..2045
/label="pol region"
/note="Moloney murine leukemia virus (MMLV) pol region
containing the splice acceptor site"
misc_feature 2077..2115
/label="E-tag"
/note="E-tag"
CDS 2125..4494
/gene="TNFAIP3"
/label="Tumor necrosis factor alpha-induced protein 3"
/note="Tumor necrosis factor alpha-induced protein 3 from
Homo sapiens. Accession#: P21580"
misc_feature 4498..4541
/label="3' UTR of hA20"
/note="3' UTR of hA20"
misc_feature 4591..5053
/label="IRES"
/note="internal ribosome entry site (IRES) of the
encephalomyocarditis virus (EMCV)"
CDS 5058..5087
/label="Myc"
/note="Myc (human c-Myc proto-oncogene) epitope tag"
CDS 5192..5209
/label="thrombin site"
/note="thrombin recognition and cleavage site"
CDS 5225..6016
/label="NeoR/KanR"
/note="aminoglycoside phosphotransferase"
LTR 6079..6672
/label="LTR"
/note="long terminal repeat from Moloney murine leukemia
virus"
misc_feature 6883..7023
/label="bom"
/note="basis of mobility region from pBR322"
rep_origin complement(7209..7797)
/direction=LEFT
/label="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(7971..8828)
/label="AmpR"
/note="beta-lactamase"
promoter complement(8829..8933)
/label="AmpR promoter"