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放线菌素D诱导HL-60细胞凋亡的观察实验-凝胶回收法

从琼脂糖凝胶电泳中回收纯化DNA 片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统, 结合DNA 制备膜技术, 具有高效快速的特点。本试剂盒纯化DNA 片段纯度高,完整性好。可直接用于连接反应, PCR 扩增。 1.  将含有目的DNA片段的琼脂糖凝胶切下,并放入2.0 ml离心管中。 2.  按1:3的比例(凝胶质量毫克数:融胶液体积微升数)加入Extraction ...

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植物组织制备基因组DNA实验-CTAB法

加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提取的目的。 1.  在所需量的CTAB抽提液中加入2-巯基乙醇,使终浓度达2%。将此溶液及CTAB溶液加热至65℃。 2.  用液氮(-196℃)或干冰(-78℃)冷却粉碎器/匀浆器,将植物组织粉碎成为细粉。 3.  将冷冻的组织转移到一个...

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放线菌素D诱导HL-60细胞凋亡的观察实验-凝胶回收法

从琼脂糖凝胶电泳中回收纯化DNA 片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统, 结合DNA 制备膜技术, 具有高效快速的特点。本试剂盒纯化DNA 片段纯度高,完整性好。可直接用于连接反应, PCR 扩增。 1.  将含有目的DNA片段的琼脂糖凝胶切下,并放入2.0 ml离心管中。 2.  按1:3的比例(凝胶质量毫克数:融胶液体积微升数)加入Extraction ...

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食管癌细胞系中干细胞样SP细胞的分离鉴定实验

一、材料准备 1.  青霉素储存液 (1)将青霉素小瓶中的80万单位的干粉充分溶解于8 ml去离子水中。 (2)分装为1 ml/管,-20℃保存。 2.  链霉素储存液 (1)将键霉素小瓶中的1 mg干粉充分溶解于10 ml去离子水中。 (2)分装为1 ml/管,-20℃保存。 3.  RPMI...

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含有目的基因真核表达 pEGFP-C1载体的构建实验-转化

转化过程所用的受体细胞一般是限制修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体(Rˉ,Mˉ),它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。受体细胞经过一些特殊方法(如电击法,CaCl 2 )处理后,细胞膜的通透性发生了暂时性的改变,成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞(Competentcells)。进入受体细胞的DNA分子通过复制,表达实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选...

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多极神经元心态学观察实验

1. 染色:镀银 2. 肉眼观察: 脊髓横切面为椭圆形。灰质居中,着色较深,呈蝴蝶形,有四个突起,两个较粗短称前角灰质,两个较细长称后角灰质。白质在灰质的周围,着色淡黄。 3. 低倍镜观察: 白质着浅黄色,位于脊髓周围,为神经纤维集中处。神经纤维呈大小不等的圆形,髓鞘溶解,呈空泡状,其中黑色小点为轴突,其间散布着较小的圆形或椭圆形神经胶质细胞核。辨认灰质的前角和后角。前角...

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方案23.16 用藻酸盐微珠培养软骨细胞

藻酸盐微珠培养基于在软骨细胞藻酸盐悬液中氯化钙的胶凝作用。 切除软骨 1.自膝关节、肩关节和髋关节取软骨。由于胚胎或幼年供体的软骨比成年供体获得较多细胞,较长时间后才衰老,故胚胎或幼年供体的软骨优于成年供体。生后一个月的Fauve de Bourgogne 兔或新西兰兔较理想。然而,成年人手术切除的髋关节也是软骨细胞的合适来源。 2. 切除软骨之前,用 CDM (软骨切除培养液(cartilage d...

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Tec真核表达载体构建及其对细胞信号的影响实验

研究认为Tec有肝组织与造血组织分布特异性,主要与EPO、EGF、IL6、GM CSF等细胞因子介导的信号转导途径密切相关,参与调控造血细胞尤其是淋巴细胞的增殖与分化。 一、材料准备 1.  细胞系培养条件:高糖DMEM,10%胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS),37℃,5%CO 2 ,孵箱培养。 2.  人宫颈癌上...

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细菌中制备基因组DNA实验-小量制备

提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质,得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从溶液中析出。 1.  培养5 ml 的细菌培养物至饱和状态,取1.5 ml 的培养物离心2 min。 2.  沉淀物加入567 μl 的TE缓冲液,用吸管反复吹打使之重悬。 3.  加入30 μl10%的SDS和3 ℃ 20 ...

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