人SERPINA1 ORF 克隆 (NM_000295) (编号: V028530)

Note: pcDNA3.1-SERPINA1(human)-EGFP (7.4 kb) is a mammalian expression vector for visualizing SERPINA1 (alpha-1 antitrypsin) localization. A CMV promoter drives expression of a SERPINA1-EGFP fusion protein, with EGFP fused at the C-terminus for direct fluorescence tracking. The vector also includes NeoR/KanR (G418 resistance) for stable selection, AmpR for bacterial selection, pUC ori, f1 ori, SV40 promoter/poly(A), bGH poly(A), and M13 priming sites.

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基本信息

载体名称:: pcDNA3.1-SERPINA1(human)-EGFP

载体抗性:: Ampicillin

Refseq ID:: NM_000295.5

载体长度:: 7408 bp

载体类型:: Protein expression

复制子:: ori

宿主:: Mammalian cells

筛选标记:: Neo/G418;EGFP

启动子:: CMV

5'引物:: CMV-F

载体标签:: EGFP

感受态:: DH5a

培养温度:: 37℃

表达方法:: Transient

描述:: Homo sapiens serpin family A member 1 (SERPINA1), transcript variant 1, mRNA

产品信息

质粒编号:V028530

质粒名称:pcDNA3.1-SERPINA1(human)-EGFP

规格:100 μg (转染级)

下载资源

克隆选择

RefSeq / 转录本

NM_000295.5

载体标签

EGFP FLAG 3xFLAG

筛选标记

Neo/G418;EGFP Puro;CopGFP Puro

表达方法

Transient Constiutive, Stable / Transient

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，供学术研究使用。

确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验效果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

质粒操作方法

1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。