我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pSTH1-GFP
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 7784 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Yamashita M, Hojo M.
pSTH1-GFP 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pSTH1-GFP 载体序列
LOCUS 40924_41355 7784 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Cloning vector pSTH1-GFP DNA, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 7784)
AUTHORS Yamashita M, Hojo M.
TITLE Transgenic zebrafish overexpressing HSP70
JOURNAL Unpublished
REFERENCE 2 (bases 1 to 7784)
AUTHORS Yamashita M.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (24-JAN-2002) Michiaki Yamashita, National Research
Institute of Fisheries Science; 2-12-4 Fukuura, Kanazawa-ku,
Yokohama, Kanagawa 236-8648, Japan (E-mail:mic@affrc.go.jp,
Tel:81-45-788-7665, Fax:81-45-788-5001)
REFERENCE 3 (bases 1 to 7784)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 7784)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName:
"Unpublished"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(24-JAN-2002) Michiaki Yamashita, National Research Institute of
Fisheries Science"; volume: " 2-12-4 Fukuura, Kanazawa-ku, Yokohama,
Kanagawa 236-8648, Japan (E-mail:mic@affrc.go.jp,
Tel:81-45-788-7665, Fax"; pages: "81-45-788-5001"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7784
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
polyA_signal 390..524
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin 649..1104
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
CDS 1392..2249
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
protein_bind 2354..2387
/label=loxP
/note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence (ATGTATGC) (Shaw et al., 2021)."
rep_origin 2465..3053
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
promoter 3516..3547
/label=lac UV5 promoter
/note="E. coli lac promoter with an 'up' mutation"
protein_bind 3555..3571
/label=lac operator
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
regulatory 3910..4243
/note="rainbow trout heat shock cognate protein HSC70
promoter"
/regulatory_class="promoter"
CDS 4402..4446
/label=S-Tag
/note="affinity and epitope tag derived from pancreatic
ribonuclease A"
regulatory 6465..6470
/regulatory_class="polyA_signal_sequence"
enhancer 6511..6814
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 6815..7018
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
CDS 7063..7779
/label=EGFP
/note="enhanced GFP"