我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pST-KT
- 载体抗性:
- Kanamycin
- 载体长度:
- 5348 bp
- 载体类型:
- Inducible expression shuttle vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Parikh A, Kumar D, Chawla Y, Kurthkoti K, Khan S, Varshney U, Nandicoori VK.
pST-KT 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pST-KT 载体序列
LOCUS 40924_41300 5348 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Inducible expression shuttle vector pST-KT, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5348)
AUTHORS Parikh A, Kumar D, Chawla Y, Kurthkoti K, Khan S, Varshney U,
Nandicoori VK.
TITLE Development of a new generation of vectors for gene expression, gene
replacement, and protein-protein interaction studies in mycobacteria
JOURNAL Appl. Environ. Microbiol. 79 (5), 1718-1729 (2013)
PUBMED 23315736
REFERENCE 2 (bases 1 to 5348)
AUTHORS Parikh A, Kumar D, Chawla Y, Kurthkoti K, Khan S, Varshney U,
Nandicoori VK.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (11-NOV-2012) Signal Transduction Lab-I, National
Institute of Immunology, Aruna Asaf Ali Marg, New Delhi, Delhi
110067, India
REFERENCE 3 (bases 1 to 5348)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 5348)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Appl.
Environ. Microbiol."; date: "2013"; volume: "79"; issue: "5"; pages:
"1718-1729"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(11-NOV-2012) Signal Transduction Lab-I, National Institute of
Immunology, Aruna Asaf Ali Marg, New Delhi, Delhi 110067, India"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
COMMENT ##Assembly-Data-START##
Assembly Method :: ClustalW v. 2.1
Sequencing Technology :: Sanger dideoxy sequencing
##Assembly-Data-END##
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5348
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
regulatory 7..308
/note="Pmyc1tetO; UV15 promoter with tetO"
/regulatory_class="promoter"
protein_bind 179..196
/gene="tetO"
/label=tet operator
/bound_moiety="tetracycline repressor TetR"
/note="bacterial operator O2 for the tetR and tetA genes"
misc_feature 315..321
/label=SD sequence
/note="SD sequence"
CDS 335..352
/label=6xHis
/note="6xHis affinity tag"
CDS 425..448
/label=FLAG
/note="FLAG(R) epitope tag, followed by an enterokinase
cleavage site"
terminator 467..509
/gene="Escherichia coli rrnB"
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 538..584
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
CDS 745..1557
/label=KanR
/note="aminoglycoside phosphotransferase"
rep_origin 1892..2480
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS 2789..3409
/label=TetR
/note="tetracycline repressor TetR"
rep_origin 3430..5323
/label=oriM
/note="oriM"