质粒编号
质粒名称
规格
价格
V004412
pMTL85151
5 μg
我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pMTL85151
- 载体长度:
- 3729 bp
- 载体类型:
- Shuttle vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Heap JT, Pennington OJ, Cartman ST, Minton NP.
pMTL85151 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pMTL85151 载体序列
LOCUS V004412 3729 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Exported.
ACCESSION V004412
VERSION V004412
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 3729)
AUTHORS Heap JT, Pennington OJ, Cartman ST, Minton NP.
TITLE A modular system for Clostridium shuttle plasmids
JOURNAL J. Microbiol. Methods 78 (1), 79-85 (2009)
PUBMED 19445976
REFERENCE 2 (bases 1 to 3729)
AUTHORS Pennington OJ, Heap JT, Cartman ST, Minton NP.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (02-MAR-2009) Centre for Biomolecular Sciences, The
University of Nottingham, University Park, Nottingham NG7 2RD,
United Kingdom
REFERENCE 3 (bases 1 to 3729)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 3729)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "J.
Microbiol. Methods"; date: "2009"; volume: "78"; issue: "1"; pages:
"79-85"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(02-MAR-2009) Centre for Biomolecular Sciences, The University of
Nottingham, University Park, Nottingham NG7 2RD, United Kingdom"
SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3729
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
regulatory 9..62
/note="terminator derived from CD0164 gene of Clostridium
difficile"
/regulatory_class="terminator"
primer_bind 63..79
/label="M13 rev"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
primer_bind complement(199..215)
/label="M13 fwd"
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
regulatory 363..404
/note="terminator derived from fdx gene of Clostridium
pasteurianum"
/regulatory_class="terminator"
CDS 783..1223
/codon_start=1
/gene="repL"
/product="plasmid replication protein"
/label="repL"
/protein_id="ACR43917.1"
/translation="MKERYGTVYKGSQRLIDEESGEVIEVDKLYRKQTSGNFVKAYIVQ
LISMLDMIGGKKLKIVNYILDNVHLSNNTMIATTREIAKATGTSLQTVITTLKILEEGN
IIKRKTGVLMLNPELLMRGDDQKQKYLLLEFGNFEQEANEID"
gene 783..1223
/gene="repL"
/label="repL"
CDS 1373..1993
/gene="catP"
/label="Chloramphenicol acetyltransferase"
/note="Chloramphenicol acetyltransferase from Clostridium
perfringens. Accession#: P26826"
rep_origin 2173..2761
/direction=RIGHT
/label="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
oriT 3082..3191
/label="oriT"
/note="incP origin of transfer"
CDS 3224..3592
/label="traJ"
/note="oriT-recognizing protein"