我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
pCMV-dR8.91, a 2nd-gen lentiviral packaging helper plasmid, forms a 3-plasmid system with pCMV-VSV - G and lentiviral vector plasmid, supplying gag and pol proteins for lentiviral packaging.
- 载体名称:
- pCMV-dR8.91
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 12051 bp
- 载体类型:
- Lentiviral vectors
- 复制子:
- ori
- 启动子:
- SV40
- 克隆方法:
- Enzyme digestion and ligation
- 感受态:
- DH10B
pCMV-dR8.91 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pCMV-dR8.91 载体序列
LOCUS Exported 12051 bp DNA circular SYN 02-SEP-2024
DEFINITION Exported.
ACCESSION V007548
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 12051)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 2 (bases 1 to 12051)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 3 (bases 1 to 12051)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..12051
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
enhancer 73..376
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 377..580
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
CDS 855..2354
/label=HIV-1 gag
/note="gag protein from human immunodeficiency virus 1"
CDS 2150..5158
/label=HIV-1 pol
/note="pol protein from human immunodeficiency virus 1"
CDS 5255..5428
/label=Protein Tat
/note="Protein Tat from Human immunodeficiency virus type 1
group M subtype B (isolate BH5). Accession#: P04612"
misc_feature 5735..5968
/label=RRE
/note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for
Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the
cytoplasm."
CDS 6153..6197
/label=gp41 peptide
/note="antigenic peptide corresponding to amino acids 655
to 669 of the HIV envelope protein gp41 (Lutje Hulsik et
al., 2013)"
CDS 6346..6387
/label=Protein Tat
/note="Protein Tat from Human immunodeficiency virus type 1
group M subtype B (isolate WMJ22). Accession#: P12509"
CDS 6491..6517
/label=NES
/note="nuclear export signal from the HIV Rev protein
(Fischer et al., 1995)"
promoter complement(7140..7158)
/label=SP6 promoter
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
promoter 7946..8050
/label=AmpR promoter
CDS 8051..8908
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
rep_origin 9082..9670
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
enhancer 9998..10376
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
intron 11379..11444
/label=small t intron
/note="SV40 (simian virus 40) small t antigen intron"
CDS 11574..11594
/label=SV40 NLS
/note="nuclear localization signal of SV40 (simian virus
40) large T antigen"