我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pACBSR-hyg
- 载体抗性:
- Hygromycin
- 载体长度:
- 7660 bp
- 载体类型:
- Bacterial Expression
- 复制子:
- p15A ori
- 启动子:
- araBAD
- 克隆方法:
- Restriction Enzyme
- 5'引物:
- AGATCTCGGGGAAATGTGCGCGGAAC
- 3'引物:
- CTCGAGGTATATATGAGTAAACTTGGTCTG
- 感受态:
- DH5alpha
- 培养温度:
- 30℃
pACBSR-hyg 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pACBSR-hyg 载体序列
LOCUS V007142 7660 bp DNA circular SYN 13-MAY-2021
DEFINITION Exported.
ACCESSION V007142
VERSION V007142
KEYWORDS pACBSR-hyg
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 7660)
AUTHORS Huang TW, Lam I, Chang HY, Tsai SF, Palsson BO, Charusanti P
TITLE Capsule deletion via a lambda-Red knockout system perturbs biofilm
formation and fimbriae expression in Klebsiella pneumoniae MGH
78578.
JOURNAL BMC Res Notes. 2014 Jan 8;7:13. doi: 10.1186/1756-0500-7-13.
PUBMED 24398052
REFERENCE 2 (bases 1 to 7660)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 3 (bases 1 to 7660)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "BMC Res
Notes."; date: "2014-01-8"; pages: "
10.1186/1756-0500-7-13"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7660
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
promoter complement(461..745)
/label="araBAD promoter"
/note="promoter of the L-arabinose operon of E. coli; the
araC regulatory gene is transcribed in the opposite
direction (Guzman et al., 1995)"
CDS 772..1647
/label="araC"
/note="L-arabinose regulatory protein"
CDS complement(2299..3321)
/label="HygR"
/note="aminoglycoside phosphotransferase from E. coli"
promoter complement(3322..3426)
/label="AmpR promoter"
rep_origin complement(3863..4408)
/direction=LEFT
/label="p15A ori"
/note="Plasmids containing the medium-copy-number p15A
origin of replication can be propagated in E. coli cells
that contain a second plasmid with the ColE1 origin."
promoter complement(4658..4749)
/label="AmpR promoter"
terminator complement(4768..4795)
/label="rrnB T2 terminator"
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
terminator complement(4887..4973)
/label="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator complement(5203..5447)
/label="lambda tL3 terminator"
/note="transcription terminator tL3 from phage lambda"
CDS complement(5451..6128)
/label="Exo"
/note="5' to 3' double-stranded DNA exonuclease in the
lambda Red system"
CDS complement(6128..6910)
/label="Beta"
/note="single-stranded DNA binding recombinase in the
lambda Red system"
CDS complement(6919..7332)
/label="Gam"
/note="inhibitor of the host RecBCD nuclease in the lambda
Red system"
CDS complement(join(7376..7660,1..420))
/gene="SCEI"
/label="Intron-encoded endonuclease I-SceI"
/note="Intron-encoded endonuclease I-SceI from
Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c).
Accession#: P03882"