我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pECGMC3
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 9286 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Cameron DE, Collins JJ.
pECGMC3 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pECGMC3 载体序列
LOCUS V007653 9286 bp DNA circular SYN 17-DEC-2018
DEFINITION Exported.
ACCESSION V007653
VERSION V007653
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 9286)
AUTHORS Cameron DE, Collins JJ.
TITLE Tunable protein degradation in bacteria
JOURNAL Unpublished
REFERENCE 2 (bases 1 to 9286)
AUTHORS Cameron DE, Collins JJ.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (12-SEP-2014) Biomedical Engineering, Boston University,
44 Cummington St., Boston, MA 02215, USA
REFERENCE 3 (bases 1 to 9286)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 9286)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT ##Assembly-Data-START##
Sequencing Technology :: Sanger dideoxy sequencing
##Assembly-Data-END##
SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName:
"Unpublished"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(12-SEP-2014) Biomedical Engineering, Boston University, 44
Cummington St., Boston, MA 02215, USA"
SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..9286
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
regulatory 1..276
/label="P32 promoter"
/note="P32 promoter"
/regulatory_class="promoter"
regulatory 226..231
/label="-35 binding site"
/note="-35 binding site"
/regulatory_class="minus_35_signal"
regulatory 249..254
/label="-10 binding site"
/note="-10 binding site"
/regulatory_class="minus_10_signal"
CDS 304..1011
/label="mCherry"
/note="monomeric derivative of DsRed fluorescent protein
(Shaner et al., 2004)"
misc_feature 1012..1095
/label="pdt#3"
/note="pdt#3"
terminator 1119..1205
/label="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
rep_origin complement(1370..1958)
/direction=LEFT
/label="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
terminator complement(2046..2140)
/label="lambda t0 terminator"
/note="transcription terminator from phage lambda"
CDS complement(2173..3030)
/label="AmpR"
/note="beta-lactamase"
promoter complement(3031..3135)
/label="AmpR promoter"
rep_origin complement(3167..5714)
/direction=LEFT
/label="AMB1"
/note="AMB1"
CDS complement(5735..6469)
/gene="ermBP"
/label="rRNA adenine N-6-methyltransferase"
/note="rRNA adenine N-6-methyltransferase from Enterococcus
faecalis. Accession#: P0A4D5"
terminator complement(6655..6682)
/label="rrnB T2 terminator"
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
CDS complement(6723..9086)
/codon_start=1
/product="mf-lon"
/label="mf-lon"
/protein_id="AIU94531.1"
/translation="MSKKIKLPIFQIRGSFIVPGIKENLEVGRKNTLASVNYAIKNSNN
QMIAIPQIDASVEKPEFSDLHEFGILIDFEVIKEWKDNSLTISTNPIQRCKVISFFENE
DQVPYAEVELIESINDFSDEELKELIEKISDAIKTKASLVTKQIKQLISGESDDLSLAF
DSIMFKLAPSKILTNPEYITSPSLKTRWSIIEKIIFAEDGIITRNAESIDAARQKNEIE
QELNHKLKEKMDKQQKEYYLREKMRIIKDELEDEDDSDDSSLEKYKERLAKEPFPEEVK
RKIMASIKRVEALQSGTPEWNTEKNYIDWMMSIPWWEETEDLTDLKYAKKILDKHHYGM
KKVKERIIEYLAVKTKTKSLKAPIITLVGPPGVGKTSLAKSIAEAVGKNFVKVSLGGVK
DESEIRGHRKTYVGSMPGRIIQTMKRAKVKNPLFLLDEIDKMASDHRGDPASAMLEVLD
PEQNKEFSDHYIEEPYDLSQVMFIATANYPEDIPEALYDRMEIINLSSYTEIEKVKIAQ
DYLVPKAIEQHELTSEEISFTEGAINEIIKYYTREAGVRQLERHINSIIRKYIVKNLNG
EMDKIVIDEKQVNDLLGKRIFDHTEKQEESQIGVVTGLAYTQFGGDILPIEVSLYPGKG
NLILTGKLGEVMKESATIALTYVKSNFEKFGVDKKVFEENDIHVHVPEGAVPKDGPSAG
ITITTALISALSDKPVSKEIGMTGEITLRGNVLPIGGLREKSISASRSGLKTIIIPKKN
ERDLDEIPDEVKAKLKIIPAEKYEEVFAIVFKTK"
regulatory complement(9105..9280)
/label="nisA promoter"
/note="nisA promoter"
/regulatory_class="promoter"
regulatory complement(9132..9137)
/label="-10 region"
/note="-10 region"
/regulatory_class="minus_10_signal"
regulatory complement(9158..9163)
/label="-35 region"
/note="-35 region"
/regulatory_class="minus_35_signal"