我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pDEST-Myc
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 6078 bp
- 载体类型:
- Mammalian vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- De Schamphelaire W, Olbrechts A, Meert J, Verhelst K, Roggeman Fonseca M, Vanhoucke M, Beyaert R.
- 启动子:
- sCMV
pDEST-Myc 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pDEST-Myc 载体序列
LOCUS 40924_14400 6078 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Mammalian vector pDEST-Myc, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 6078)
AUTHORS De Schamphelaire W, Olbrechts A, Meert J, Verhelst K, Roggeman
Fonseca M, Vanhoucke M, Beyaert R.
TITLE BCCM/LMBP Plasmid collection
JOURNAL Unpublished
REFERENCE 2 (bases 1 to 6078)
AUTHORS De Schamphelaire W.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (02-FEB-2017) BCCM/LMBP, Universiteit Gent,
Technologiepark 927, 9052, BELGIUM
REFERENCE 3 (bases 1 to 6078)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 6078)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName:
"Unpublished"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(02-FEB-2017) BCCM/LMBP, Universiteit Gent, Technologiepark 927,
9052, BELGIUM"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6078
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
regulatory complement(1..17)
/label=T7 promoter
/note="T7 promoter"
/regulatory_class="promoter"
polyA_signal complement(22..156)
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
promoter complement(269..287)
/label=T3 promoter
/note="promoter for bacteriophage T3 RNA polymerase"
primer_bind complement(308..324)
/label=M13 rev
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind complement(332..348)
/label=lac operator
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(356..386)
/label=lac promoter
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind complement(401..422)
/label=CAP binding site
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
rep_origin complement(710..1298)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(1472..2329)
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
promoter complement(2330..2434)
/label=AmpR promoter
rep_origin complement(2460..2915)
/direction=LEFT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 2989..3973
/label=CMV IE94 promoter
/note="enhancer/promoter region of simian cytomegalovirus
major immediate early transcription unit IE94"
promoter 4008..4026
/label=SP6 promoter
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
CDS 4076..4105
/label=Myc
/note="Myc (human c-Myc proto-oncogene) epitope tag"
misc_feature 4115..4144
/label=Myc epitope
/note="Myc epitope"
CDS 4115..4144
/codon_start=1
/product="Myc (human c-Myc proto-oncogene) epitope tag"
/label=Myc
/translation="EQKLISEEDL"
misc_feature 4154..4183
/label=Myc epitope
/note="Myc epitope"
CDS 4154..4183
/codon_start=1
/product="Myc (human c-Myc proto-oncogene) epitope tag"
/label=Myc
/translation="EQKLISEEDL"
misc_feature 4193..4222
/label=Myc epitope
/note="Myc epitope"
CDS 4193..4222
/codon_start=1
/product="Myc (human c-Myc proto-oncogene) epitope tag"
/label=Myc
/translation="EQKLISEEDL"
misc_feature 4232..4261
/label=Myc epitope
/note="Myc epitope"
CDS 4232..4261
/codon_start=1
/product="Myc (human c-Myc proto-oncogene) epitope tag"
/label=Myc
/translation="EQKLISEEDL"
misc_feature 4295..4324
/label=Myc epitope
/note="Myc epitope"
CDS 4295..4324
/codon_start=1
/product="Myc (human c-Myc proto-oncogene) epitope tag"
/label=Myc
/translation="EQKLISEEDL"
protein_bind 4352..4476
/label=attR1
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
promoter 4501..4531
/label=lac UV5 promoter
/note="E. coli lac promoter with an 'up' mutation"
CDS 4585..5241
/label=CmR
/note="chloramphenicol acetyltransferase"
CDS 5586..5888
/label=ccdB
/note="CcdB, a bacterial toxin that poisons DNA gyrase"
protein_bind complement(5932..6056)
/label=attR2
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"