我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pAJM.969
- 载体抗性:
- Kanamycin
- 载体长度:
- 4558 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- p15A ori
- 载体来源:
- Meyer AJ, Segall-Shapiro TH, Voigt CA.
pAJM.969 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pAJM.969 载体序列
LOCUS V009539 4558 bp DNA circular SYN 17-DEC-2018
DEFINITION Exported.
ACCESSION V009539
VERSION V009539
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 4558)
AUTHORS Meyer AJ, Segall-Shapiro TH, Voigt CA.
TITLE Marionette: E. coli containing 12 highly-optimized small molecule
sensors
JOURNAL bioRxivorg 285866, 1-26 (2018)
REFERENCE 2 (bases 1 to 4558)
AUTHORS Meyer AJ, Segall-Shapiro TH, Voigt CA.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (21-MAR-2018) Synthetic Biology Center, Department of
Biological Engineering, Massachusetts Institute of Technology, 77
Massachusetts Avenue, Cambridge, MA 02139, USA
REFERENCE 3 (bases 1 to 4558)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 4558)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "bioRxivorg
285866, 1-26 (2018)"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(21-MAR-2018) Synthetic Biology Center, Department of Biological
Engineering, Massachusetts Institute of Technology, 77 Massachusetts
Avenue, Cambridge, MA 02139, USA"
SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4558
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
regulatory 1..53
/label="L3S3P21"
/note="L3S3P21"
/regulatory_class="terminator"
regulatory 73..124
/label="PMph"
/note="PMph"
/regulatory_class="promoter"
misc_feature 74..108
/label="MphO operator"
/note="MphO operator"
regulatory 76..81
/regulatory_class="minus_35_signal"
regulatory 99..104
/regulatory_class="minus_10_signal"
regulatory 111
/label="+1"
/note="+1"
/regulatory_class="other"
misc_RNA 126..176
/label="sTRSV HHRz"
/note="hammerhead ribozyme from the tobacco ringspot virus
satellite RNA (Khvorova et al., 2003)"
regulatory 208..219
/label="B0064"
/note="B0064"
/regulatory_class="ribosome_binding_site"
CDS 226..942
/label="EYFP"
/note="enhanced YFP"
regulatory 946..1006
/label="L3S2P21"
/note="L3S2P21"
/regulatory_class="terminator"
regulatory 1011..1064
/label="PLacIQ"
/note="PLacIQ"
/regulatory_class="promoter"
regulatory 1029..1034
/regulatory_class="minus_35_signal"
regulatory 1052..1057
/regulatory_class="minus_10_signal"
regulatory 1065..1092
/label="mph2"
/note="mph2"
/regulatory_class="ribosome_binding_site"
CDS 1093..1677
/codon_start=1
/product="MphR-AM"
/label="MphR-AM"
/protein_id="AYJ72267.1"
/translation="MPRPKLKSDDEVLEAATVVLKRCGPIEFTLSGVAKEVGLSRAALI
QRFTNRDTLLVRMMERGVEQVRHYLNAIPIGAGPQGLWEFLQVLVRSMDTRNDFSVNYL
ISWYELQVPELRTLAIQRNRAVVEGIRKRLPPGAPAAAELLLHSVIAGATMQWAVDPDG
ELADHVLAQIAAILCLMFPEHDDFQLLQAHA"
regulatory 1678..1698
/label="ery1"
/note="ery1"
/regulatory_class="ribosome_binding_site"
CDS 1699..2430
/gene="ermC"
/label="rRNA adenine N-6-methyltransferase"
/note="rRNA adenine N-6-methyltransferase from
Staphylococcus aureus. Accession#: P02979"
regulatory 2443..2697
/label="induction operon terminator region"
/note="induction operon terminator region"
/regulatory_class="terminator"
rep_origin complement(3009..3554)
/direction=LEFT
/label="p15A ori"
/note="Plasmids containing the medium-copy-number p15A
origin of replication can be propagated in E. coli cells
that contain a second plasmid with the ColE1 origin."
CDS complement(3646..4458)
/label="KanR"
/note="aminoglycoside phosphotransferase"