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pGro7 质粒 (编号: V012802)

Note: Plasmids of chaperone. The function of the plasmid pGro7 is to express the GroEL and GroES proteins, which are chaperonins involved in protein folding in the cytoplasm of Escherichia coli. pGro7 is a high-copy-number plasmid, meaning that it exists in multiple copies per cell, and it is often used for overexpression of proteins in E. coli. The GroEL and GroES proteins form a complex that helps to fold newly synthesized proteins into their correct conformation, preventing protein aggregation and enhancing protein stability. pGro7 is a valuable tool in molecular biology for protein production and research.

pGro75467 bp60012001800240030003600420048005400CmRS loopChaperonin GroELp15A oricat promoter
复制序列 NovoBuilder中查看图谱

基本信息

载体名称:
pGro7
载体抗性:
Chloramphenicol
载体长度:
5467 bp
载体类型:
E.coli expression plasmid
复制子:
p15A ori
载体来源:
Takara
拷贝数:
Medium copy number
感受态:
DH10B
培养温度:
37℃

产品信息

质粒编号:V012802
质粒名称:pGro7
规格:5 μg (冻干粉)

下载资源

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，供学术研究使用。

确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验效果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

质粒操作方法

1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

参考文献

  • Pei C, Peng X, Wu Y, Jiao R, Li T, Jiao S, Zhou L, Li J, Du Y, Qian EW. Characterization and application of active human α2,6-sialyltransferases ST6GalNAc V and ST6GalNAc VI recombined in Escherichia coli. Enzyme Microb Technol. 2024 Mar 12;177:110426. doi: 10.1016/j.enzmictec.2024.110426. Epub ahead of print. PMID: 38503081.

pGro7 质粒 (编号: V012802)序列

LOCUS       Exported                5467 bp DNA     circular SYN 28-NOV-2025
DEFINITION  Exported.
ACCESSION   V012802
VERSION     .
KEYWORDS    pGro7
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
REFERENCE   1  (bases 1 to 5467)
  TITLE     Direct Submission
REFERENCE   2  (bases 1 to 5467)
  AUTHORS   .
  TITLE     Direct Submission
COMMENT     SGRef: number: 1; type: "Journal Article"
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..5467
                     /mol_type="other DNA"
                     /organism="synthetic DNA construct"
     CDS             1860..1913
                     /label=S loop
                     /note="GroES chaperone mobile loop that interacts with
                     GroEL"
     CDS             2152..3795
                     /gene="groEL"
                     /label=Chaperonin GroEL
                     /note="Chaperonin GroEL from Escherichia coli O8 (strain
                     IAI1). Accession#: B7M8Q4"
     rep_origin      4075..4620
                     /label=p15A ori
                     /note="Plasmids containing the medium-copy-number p15A
                     origin of replication can be propagated in E. coli cells 
                     that contain a second plasmid with the ColE1 origin."
     promoter        5146..5248
                     /label=cat promoter
                     /note="promoter of the E. coli cat gene encoding
                     chloramphenicol acetyltransferase"
     CDS             join(5249..5467,1..438)
                     /label=CmR
                     /note="chloramphenicol acetyltransferase"