我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- mEos3.2-Tubulin-C-18
- 载体抗性:
- Kanamycin
- 载体长度:
- 6042 bp
- 载体类型:
- Mammalian Expression
- 复制子:
- ori
- 筛选标记:
- Neomycin (select with G418)
- 拷贝数:
- High Copy
- 启动子:
- CMV
- 5'引物:
- CMV-F
- 3'引物:
- SV40pA-R
mEos3.2-Tubulin-C-18 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
mEos3.2-Tubulin-C-18 载体序列
LOCUS V012210 6042 bp DNA circular SYN 13-MAY-2021
DEFINITION Exported.
ACCESSION V012210
VERSION V012210
KEYWORDS mEos3.2-Tubulin-C-18
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 6042)
TITLE Davidson Photoactivatable Fluorescent Proteins
REFERENCE 2 (bases 1 to 6042)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 3 (bases 1 to 6042)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6042
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
enhancer 68..371
/label="CMV enhancer"
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 372..575
/label="CMV promoter"
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
CDS 620..1297
/label="mEos3.2"
/note="improved monomeric variant of green-to-red
photoswitchable fluorescent protein EosFP (Zhang et al.,
2012)"
CDS 1352..2704
/gene="Tuba1b"
/label="Tubulin alpha-1B chain"
/note="Tubulin alpha-1B chain from Rattus norvegicus.
Accession#: Q6P9V9"
polyA_signal 2837..2958
/label="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(2965..3420)
/direction=LEFT
/label="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 3447..3551
/label="AmpR promoter"
promoter 3553..3910
/label="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
CDS 3945..4736
/label="NeoR/KanR"
/note="aminoglycoside phosphotransferase"
primer_bind complement(4927..4946)
/label="TK-pA-R"
/note="Thymidine kinase polyA, reverse primer"
polyA_signal 4971..5018
/label="HSV TK poly(A) signal"
/note="herpes simplex virus thymidine kinase
polyadenylation signal (Cole and Stacy, 1985)"
rep_origin 5347..5935
/direction=RIGHT
/label="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"