我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pBTK800
- 载体抗性:
- Streptomycin
- 载体长度:
- 8415 bp
- 复制子:
- RSF1010 oriV
pBTK800 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pBTK800 载体序列
LOCUS 62056_4230 8415 bp DNA circular SYN 01-JAN-1980
DEFINITION synthetic circular DNA.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 8415)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8415
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
oriT complement(2091..2178)
/direction=LEFT
/label=RSF1010 oriT
/note="origin of transfer of the broad-host-range plasmid
RSF1010 (Scholz et al., 1989)"
rep_origin 2520..2914
/label=RSF1010 oriV
/note="replication origin of the broad-host-range plasmid
RSF1010; requires the RSF1010 RepA/B/C proteins for
replication (Scholz et al., 1989)"
CDS 3849..4562
/codon_start=1
/label=superfolder GFP
/note="GFP variant that folds robustly even when fused to
poorly folded proteins (Pedelacq et al., 2006)"
/translation="MRKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVRGEGEGDATNGKLTLK
FICTTGKLPVPWPTLVTTLTYGVQCFARYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTISFKDDG
TYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYNFNSHNVYITADKQKNGIKA
NFKIRHNVEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSVLSKDPNEKRDHMVLLE
FVTAAGITHGMDELYK"
terminator 4574..4645
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 4661..4688
/label=T7Te terminator
/note="phage T7 early transcription terminator"
CDS complement(4940..5728)
/codon_start=1
/label=SmR
/note="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy, 1985)"
/translation="MREAVIAEVSTQLSEVVGVIERHLEPTLLAVHLYGSAVDGGLKPH
SDIDLLVTVTVRLDETTRRALINDLLETSASPGESEILRAVEVTIVVHDDIIPWRYPAK
RELQFGEWQRNDILAGIFEPATIDIDLAILLTKAREHSVALVGPAAEELFDPVPEQDLF
EALNETLTLWNSPPDWAGDERNVVLTLSRIWYSAVTGKIAPKDVAADWAMERLPAQYQP
VILEARQAYLGQEEDRLASRADQLEEFVHYVKGEITKVVGK"
CDS complement(6111..6959)
/codon_start=1
/label=RSF1010 RepC
/note="replication protein C of the broad-host-range
plasmid RSF1010 (Scholz et al., 1989)"
/translation="VVKPKNKHSLSHVRHDPAHCLAPGLFRALKRGERKRSKLDVTYDY
GDGKRIEFSGPEPLGADDLRILQGLVAMAGPNGLVLGPEPKTEGGRQLRLFLEPKWEAV
TADAMVVKGSYRALAKEIGAEVDSGGALKHIQDCIERLWKVSIIAQNGRKRQGFRLLSE
YASDEADGRLYVALNPLIAQAVMGGGQHVRISMDEVRALDSETARLLHQRLCGWIDPGK
TGKASIDTLCGYVWPSEASGSTMRKRRQRVREALPELVALGWTVTEFAAGKYDITRPKA
AG"
CDS complement(6949..7785)
/codon_start=1
/label=RSF1010 RepA
/note="replication protein A of the broad-host-range
plasmid RSF1010 (Scholz et al., 1989)"
/translation="MATHKPINILEAFAAAPPPLDYVLPNMVAGTVGALVSPGGAGKSM
LALQLAAQIAGGPDLLEVGELPTGPVIYLPAEDPPTAIHHRLHALGAHLSAEERQAVAD
GLLIQPLIGSLPNIMAPEWFDGLKRAAEGRRLMVLDTLRRFHIEEENASGPMAQVIGRM
EAIAADTGCSIVFLHHASKGAAMMGAGDQQQASRGSSVLVDNIRWQSYLSSMTSAEAEE
WGVDDDQRRFFVRFGVSKANYGAPFADRWFRRHDGGVLKPAVLERQRKSKGVPRGEA"
CDS complement(join(8299..8415,1..852))
/codon_start=1
/label=RSF1010 RepB
/note="replication protein B of the broad-host-range
plasmid RSF1010 (Scholz et al., 1989)"
/translation="MKNDRTLQAIGRQLKAMGCERFDIGVRDATTGQMMNREWSAAEVL
QNTPWLKRMNAQGNDVYIRPAEQERHGLVLVDDLSEFDLDDMKAEGREPALVVETSPKN
YQAWVKVADAAGGELRGQIARTLASEYDADPASADSRHYGRLAGFTNRKDKHTTRAGYQ
PWVLLRESKGKTATAGPALVQQAGQQIEQAQRQQEKARRLASLELPERQLSRHRRTALD
EYRSEMAGLVKRFGDDLSKCDFIAAQKLASRGRSAEEIGKAMAEASPALAERKPGHEAD
YIERTVSKVMGLPSVQLARAELARAPAPRQRGMDRGGPDFSM"