我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pANo-1
- 载体抗性:
- Kanamycin
- 载体长度:
- 2784 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- p15A ori
- 载体来源:
- Pollak B, Matute T, Nunez I, Cerda A
pANo-1 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pANo-1 载体序列
LOCUS 62056_3135 2784 bp DNA circular SYN 07-DEC-2019
DEFINITION Cloning vector pANo-1, complete sequence.
ACCESSION MN436796
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 2784)
AUTHORS Pollak B, Matute T, Nunez I, Cerda A, Lopez C, Vargas V, Kan A,
Bielinski V, von Dassow P, Dupont CL, Federici F.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (11-SEP-2019) Millennium Institute for Integrative Biology
- iBio, Portugal 49, Santiago, RM 8331150, Chile
REFERENCE 2 (bases 1 to 2784)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(11-SEP-2019) Millennium Institute for Integrative Biology - iBio,
Portugal 49, Santiago, RM 8331150, Chile"
COMMENT ##Assembly-Data-START##
Sequencing Technology :: Sanger dideoxy sequencing
##Assembly-Data-END##
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2784
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
misc_feature 1..40
/label=UNS1
/note="UNS1"
misc_feature 44..50
/label=SapI
/note="SapI"
misc_feature 52..54
/label=Alpha
/note="Alpha"
misc_feature 56..59
/label=A
/note="A"
misc_feature 61..66
/label=BsaI
/note="BsaI"
protein_bind 131..152
/label=CAP binding site
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
promoter 167..197
/label=lac promoter
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind 205..221
/label=lac operator
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
primer_bind 229..245
/label=M13 rev
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
misc_feature complement(258..314)
/label=MCS
/note="pUC18/19 multiple cloning site"
primer_bind complement(315..331)
/label=M13 fwd
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
misc_feature complement(666..671)
/label=BsaI
/note="BsaI"
misc_feature 673..676
/label=F
/note="F"
misc_feature 678..680
/label=Beta
/note="Beta"
misc_feature complement(682..688)
/label=SapI
/note="SapI"
misc_feature 692..731
/label=UNSX
/note="UNSX"
misc_feature 1121
/label=Mut T->C
/note="Mut T->C"
rep_origin complement(1178..1723)
/direction=LEFT
/label=p15A ori
/note="Plasmids containing the medium-copy-number p15A
origin of replication can be propagated in E. coli cells
that contain a second plasmid with the ColE1 origin."
CDS complement(1815..2627)
/label=KanR
/note="aminoglycoside phosphotransferase"