我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pBla_gg
- 载体抗性:
- Bleomycin
- 载体长度:
- 2667 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- p15A ori
- 载体来源:
- Hashimoto K, Fischer EC, Romesberg FE.
- 启动子:
- EM7
pBla_gg 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pBla_gg 载体序列
LOCUS 62056_4080 2667 bp DNA circular SYN 16-JUN-2021
DEFINITION Cloning vector pBla_gg, complete sequence.
ACCESSION MW816823
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 2667)
AUTHORS Hashimoto K, Fischer EC, Romesberg FE.
TITLE Efforts toward Further Integration of an Unnatural Base Pair into
the Biology of a Semisynthetic Organism
JOURNAL J Am Chem Soc (2021) In press
PUBMED 34096294
REFERENCE 2 (bases 1 to 2667)
AUTHORS Hashimoto K.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (25-MAR-2021) Department of Chemistry, The Scripps
Research Institute, 10550 North Torrey Pines Road, La Jolla, CA
92037, USA
REFERENCE 3 (bases 1 to 2667)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "J Am Chem
Soc (2021) In press"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(25-MAR-2021) Department of Chemistry, The Scripps Research
Institute, 10550 North Torrey Pines Road, La Jolla, CA 92037, USA"
COMMENT ##Assembly-Data-START##
Sequencing Technology :: Sanger dideoxy sequencing
##Assembly-Data-END##
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2667
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
rep_origin 109..654
/label=p15A ori
/note="Plasmids containing the medium-copy-number p15A
origin of replication can be propagated in E. coli cells
that contain a second plasmid with the ColE1 origin."
promoter 807..911
/label=AmpR promoter
RBS 926..948
/label=RBS
/note="efficient ribosome binding site from bacteriophage
T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"
gene 957..1787
/gene="bla"
/label=bla
CDS join(957..1134,1153..1787)
/codon_start=1
/transl_table=11
/gene="bla"
/product="beta-lactamase TEM-1"
/label=bla
/protein_id="QWO78781.1"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLDSGKILESFRRAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYSPVTEKHLTDGMTVREL
CSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRWEPELNEAIPNDERDTT
MPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSALPAGWFIADKSGAGER
GSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGASLIKHW"
misc_feature 1130..1134
/gene="bla"
/label=UBP
/note="UBP"
misc_feature 1135..1140
/gene="bla"
/label=BsaI
/note="BsaI"
misc_feature 1141..1146
/gene="bla"
/label=KpnI
/note="KpnI"
misc_feature 1147..1152
/gene="bla"
/label=BsaI
/note="BsaI"
misc_feature 1153..1159
/gene="bla"
/label=UBP
/note="UBP"
misc_feature 1819..1854
/label=proK terminator
/note="proK terminator"
promoter 1884..1914
/label=lac promoter
/note="promoter for the E. coli lac operon"
misc_feature 1926..1932
/label=5' leader from serT
/note="5' leader from serT"
misc_feature 1933..1994
/label=tRNA Ser(UGA)
/note="tRNA Ser(UGA)"
misc_feature 1947..1952
/label=BsaI
/note="BsaI"
misc_feature 1953..1958
/label=KpnI
/note="KpnI"
misc_feature 1959..1964
/label=BsaI
/note="BsaI"
misc_feature 1995..2037
/label=3' UTR from serT
/note="3' UTR from serT"
misc_feature 2038..2073
/label=proK terminator
/note="proK terminator"
promoter 2121..2168
/label=EM7 promoter
/note="synthetic bacterial promoter"
CDS 2187..2558
/label=BleoR
/note="antibiotic-binding protein"
terminator 2573..2667
/label=lambda t0 terminator
/note="transcription terminator from phage lambda"