我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pSoup-P19
- 载体抗性:
- Tetracycline
- 载体长度:
- 10771 bp
- 载体类型:
- Packaging assistance
- 复制子:
- oriV
- 宿主:
- Plants
- 启动子:
- CaMV 35S
- 感受态:
- DH10B
- 培养温度:
- 37℃
pSoup-P19 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pSoup-P19 载体序列
LOCUS V014964 10771 bp DNA circular SYN 01-JAN-1980 DEFINITION Exported. ACCESSION V014964 VERSION V014964 KEYWORDS . SOURCE synthetic DNA construct ORGANISM synthetic DNA construct . REFERENCE 1 (bases 1 to 10771) AUTHORS . TITLE Direct Submission FEATURES Location/Qualifiers source 1..10771 /mol_type="other DNA" /organism="synthetic DNA construct" oriT 618..727 /label="oriT" /note="incP origin of transfer" CDS 760..1128 /label="traJ" /note="oriT-recognizing protein" rep_origin 1258..1969 /label="oriV" /note="incP origin of replication" misc_feature 2469..2491 /label="LB T-DNA repeat" /note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA (truncated)" promoter 2682..2700 /label="T7 promoter" /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase" polyA_signal complement(2776..2952) /label="CaMV poly(A) signal" /note="cauliflower mosaic virus polyadenylation signal" CDS complement(3025..3540) /note="RNA silencing suppressor p19 from Tomato bushy stunt virus (strain Cherry). Accession#: P11690" /label="RNA silencing suppressor p19" promoter complement(3579..3924) /label="CaMV 35S promoter" /note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic virus" promoter complement(3998..4016) /label="T3 promoter" /note="promoter for bacteriophage T3 RNA polymerase" promoter complement(4085..4115) /label="lac promoter" /note="promoter for the E. coli lac operon" protein_bind complement(4130..4151) /label="CAP binding site" /note="CAP binding activates transcription in the presence of cAMP." promoter 4398..4426 /label="tet promoter" /note="E. coli promoter for tetracycline efflux protein gene" CDS 4474..5661 /label="TcR" /note="tetracycline efflux protein" CDS 6163..7308 /label="trfA" /note="trans-acting replication protein that binds to and activates oriV" CDS 8692..9660 /label="RepA" /note="replication protein of plasmid pSa" CDS 10058..10705 /label="TetR" /note="tetracycline resistance regulatory protein"