质粒编号
质粒名称
规格
价格
V014964
pSoup-P19
5 μg (冻干粉)
我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供学术研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
Note:
- 载体名称:
- pSoup-P19
- 载体抗性:
- Tetracycline
- Refseq ID:
- pSoup+P19; pSoupP19
- 载体长度:
- 10771 bp
- 载体类型:
- Packaging assistance
- 复制子:
- oriV
- 宿主:
- Plants
- 启动子:
- CaMV 35S
- 感受态:
- DH10B
- 培养温度:
- 37℃
pSoup-P19 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pSoup-P19 载体序列
LOCUS V014964 10771 bp DNA circular SYN 01-JAN-1980
DEFINITION Exported.
ACCESSION V014964
VERSION V014964
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 10771)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..10771
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
oriT 618..727
/label="oriT"
/note="incP origin of transfer"
CDS 760..1128
/label="traJ"
/note="oriT-recognizing protein"
rep_origin 1258..1969
/label="oriV"
/note="incP origin of replication"
misc_feature 2469..2491
/label="LB T-DNA repeat"
/note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA
(truncated)"
promoter 2682..2700
/label="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
polyA_signal complement(2776..2952)
/label="CaMV poly(A) signal"
/note="cauliflower mosaic virus polyadenylation signal"
CDS complement(3025..3540)
/note="RNA silencing suppressor p19 from Tomato bushy stunt
virus (strain Cherry). Accession#: P11690"
/label="RNA silencing suppressor p19"
promoter complement(3579..3924)
/label="CaMV 35S promoter"
/note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic
virus"
promoter complement(3998..4016)
/label="T3 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T3 RNA polymerase"
promoter complement(4085..4115)
/label="lac promoter"
/note="promoter for the E. coli lac operon"
protein_bind complement(4130..4151)
/label="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
promoter 4398..4426
/label="tet promoter"
/note="E. coli promoter for tetracycline efflux protein
gene"
CDS 4474..5661
/label="TcR"
/note="tetracycline efflux protein"
CDS 6163..7308
/label="trfA"
/note="trans-acting replication protein that binds to and
activates oriV"
CDS 8692..9660
/label="RepA"
/note="replication protein of plasmid pSa"
CDS 10058..10705
/label="TetR"
/note="tetracycline resistance regulatory protein"