首页技术支持质粒载体

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。

所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。

确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

The pHelper is a Adeno-associated viruses (AAV) helper plasmid. Specific gene products can be provided by helper plasmids (e.g., pHelper) and specific packaging cell lines (e.g., HEK293 cells) during AAV production.

载体名称:
pHelper
载体抗性:
Ampicillin
载体长度:
11635 bp
载体类型:
Cloning vector
复制子:
ori
载体来源:
Grafsky AJ III.
感受态:
stbl3
培养温度:
37℃

pHelper 载体图谱

pHelper11635 bp50010001500200025003000350040004500500055006000650070007500800085009000950010000105001100011500DNA-binding proteinShutoff proteinEarly 4 ORF1 proteinEarly 4 ORF3 proteinEarly 4 ORF6 proteinsimilar to Adenovirus-5 VAoriAmpRAmpR promoterf1 ori

质粒操作方法

1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

pHelper 载体序列

LOCUS       V005569                11635 bp    DNA     circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION  Exported.
ACCESSION   V005569
VERSION     V005569
KEYWORDS    .
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
            .
REFERENCE   1  (bases 1 to 11635)
  AUTHORS   Grafsky AJ III.
  TITLE     pHelper for use in the AAV Helper-Free System
  JOURNAL   Unpublished
REFERENCE   2  (bases 1 to 11635)
  AUTHORS   Grafsky AJ III.
  TITLE     Direct Submission
  JOURNAL   Submitted (16-APR-2001) Technical Services, Stratagene, 11011 N.
            Torrey Pines Rd., La Jolla, CA 92037, USA
REFERENCE   3  (bases 1 to 11635)
  TITLE     Direct Submission
REFERENCE   4  (bases 1 to 11635)
  AUTHORS   .
  TITLE     Direct Submission
COMMENT     SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName:
            "Unpublished"
            SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
            (16-APR-2001) Technical Services, Stratagene, 11011 N. Torrey Pines
            Rd., La Jolla, CA 92037, USA"
            SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..11635
                     /mol_type="other DNA"
                     /organism="synthetic DNA construct"
     CDS             complement(261..1847)
                     /gene="DBP"
                     /label="DNA-binding protein"
                     /note="DNA-binding protein from Human adenovirus C serotype
                     2. Accession#: P03264"
     CDS             1876..4290
                     /gene="L4"
                     /label="Shutoff protein"
                     /note="Shutoff protein from Human adenovirus C serotype 2.
                     Accession#: P24932"
     CDS             5647..6030
                     /note="Early 4 ORF1 protein from Human adenovirus C
                     serotype 2. Accession#: P03242"
                     /label="Early 4 ORF1 protein"
     CDS             6475..6822
                     /note="Early 4 ORF3 protein from Human adenovirus C
                     serotype 2. Accession#: P03241"
                     /label="Early 4 ORF3 protein"
     CDS             7103..7984
                     /note="Early 4 ORF6 protein from Human adenovirus C
                     serotype 2. Accession#: P03239"
                     /label="Early 4 ORF6 protein"
     misc_feature    complement(8537..9280)
                     /label="similar to Adenovirus-5 VA"
                     /note="similar to Adenovirus-5 VA"
     rep_origin      complement(9423..10011)
                     /direction=LEFT
                     /label="ori"
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
                     replication"
     CDS             complement(10185..11042)
                     /label="AmpR"
                     /note="beta-lactamase"
     promoter        complement(11043..11147)
                     /label="AmpR promoter"
     rep_origin      complement(11173..11628)
                     /direction=LEFT
                     /label="f1 ori"
                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
                     indicates direction of (+) strand synthesis"