我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
The pFastBac1 is a insect cells expression vector for high-level protein expression using the Bac-to-Bac baculovirus system.
- 载体名称:
- pFastBac1
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 4776 bp
- 载体类型:
- Insect Cell Vectors
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Invitrogen (Life Technologies)
- 拷贝数:
- High copy number
- 启动子:
- polyhedrin
pFastBac1 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pFastBac1 载体序列
LOCUS Exported 4776 bp DNA circular SYN 03-SEP-2024
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4776)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4776
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
promoter 178..269
/gene="polh from Autographa californica"
/label=polyhedrin promoter
/note="promoter for the baculovirus polyhedrin gene"
polyA_signal 540..674
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
mobile_element 703..868
/mobile_element_type="transposon:Tn7"
/label=Tn7L
/note="mini-Tn7 element (left end of the Tn7 transposon)"
rep_origin 1052..1506
/direction=RIGHT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 1532..1636
/gene="bla"
/label=AmpR promoter
CDS 1637..2497
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/label=AmpR
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 2668..3256
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
mobile_element 3561..3785
/mobile_element_type="transposon:Tn7"
/label=Tn7R
/note="mini-Tn7 element (right end of the Tn7 transposon)"
CDS complement(3852..4385)
/codon_start=1
/gene="aacC1"
/product="gentamycin acetyltransferase"
/label=GmR
/note="confers resistance to gentamycin"
/translation="MLRSSNDVTQQGSRPKTKLGGSSMGIIRTCRLGPDQVKSMRAALD
LFGREFGDVATYSQHQPDSDYLGNLLRSKTFIALAAFDQEAVVGALAAYVLPKFEQPRS
EIYIYDLAVSGEHRRQGIATALINLLKHEANALGAYVIYVQADYGDDPAVALYTKLGIR
EEVMHFDIDPSTAT"
promoter complement(4574..4602)
/gene="intI1 (promoter lies within the coding sequence)"
/label=Pc promoter
/note="class 1 integron promoter"