我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- prHom-Nuc1
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 6064 bp
- 载体类型:
- Mammalian Expression Vectors
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Clontech
- 拷贝数:
- High copy number
- 启动子:
- SV40
prHom-Nuc1 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
prHom-Nuc1 载体序列
LOCUS prHom-Nuc1. 6064 bp DNA circular SYN 01-JAN-1980
DEFINITION Mammalian vector encoding three FKBP homodimerizer domains, for
creating nuclear oligomers that can be dissociated with a drug. Also
known as pC4EN-FM3.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS prHom-Nuc1
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 6064)
AUTHORS Clontech
TITLE Direct Submission
REFERENCE 2 (bases 1 to 6064)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"
COMMENT Clone into the XbaI site to target the partner protein to the
nucleus and to fuse three copies of DmrD to its C-terminus.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6064
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
enhancer 19..322
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 323..526
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
5'UTR 616..655
/label=HSV TK 5'-UTR
/note="5' untranslated region from the herpes simplex virus
thymidine kinase gene"
CDS 673..675
/codon_start=1
/product="start codon"
/label=start codon
/note="ATG"
/translation="M"
CDS 685..711
/label=HA
/note="HA (human influenza hemagglutinin) epitope tag"
CDS 733..753
/label=SV40 NLS
/note="nuclear localization signal of SV40 (simian virus
40) large T antigen"
CDS 760..1080
/label=DmrD
/note="dimeric F36M mutant of FK506-binding protein FKBP12"
CDS 1087..1407
/codon_start=1
/product="dimeric F36M mutant of FK506-binding protein
FKBP12"
/label=dimeric F36M mutant of FK506-binding protein
FK
/note="DmrD"
/note="dimerization can be reversed by ligand binding"
/translation="GVQVETISPGDGRTFPKRGQTCVVHYTGMLEDGKKMDSSRDRNKP
FKFMLGKQEVIRGWEEGVAQMSVGQRAKLTISPDYAYGATGHPGIIPPHATLVFDVELL
KLE"
CDS 1414..1734
/codon_start=1
/product="dimeric F36M mutant of FK506-binding protein
FKBP12"
/label=dimeric F36M mutant of FK506-binding protein
FK
/note="DmrD"
/note="dimerization can be reversed by ligand binding"
/translation="GVQVETISPGDGRTFPKRGQTCVVHYTGMLEDGKKMDSSRDRNKP
FKFMLGKQEVIRGWEEGVAQMSVGQRAKLTISPDYAYGATGHPGIIPPHATLVFDVELL
KLE"
intron 1766..2338
/label=beta-globin intron
/note="intron from rabbit beta-globin gene"
polyA_signal 2535..2590
/label=beta-globin poly(A) signal
/note="rabbit beta-globin polyadenylation signal (Gil and
Proudfoot, 1987)"
rep_origin complement(2943..3078)
/direction=LEFT
/label=SV40 ori
/note="SV40 origin of replication"
rep_origin complement(3355..3943)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(4114..4986)
/codon_start=1
/product="beta-lactamase"
/label=beta-lactamase
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFQVEVAMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDL
VEYSPVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTR
LDRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPL
LRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAE
IGASLIKHW"
promoter complement(4987..5091)
/label=AmpR promoter
rep_origin complement(5423..5878)
/direction=LEFT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
primer_bind 6023..6039
/label=M13 fwd
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
promoter 6046..6064
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"