我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
pLP1 is a lentiviral packaging plasmid containing the HIV-1 gag and pol genes.
- 载体名称:
- pLP1
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 8890 bp
- 载体类型:
- Viral Expression & Packaging Vectors
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Invitrogen (Life Technologies)
- 拷贝数:
- High copy number
- 启动子:
- CMV+intron
- 感受态:
- DH10B
pLP1 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pLP1 载体序列
LOCUS Exported 8890 bp DNA circular SYN 02-SEP-2024 DEFINITION Lentiviral packaging plasmid containing the HIV-1 gag and pol genes. ACCESSION . VERSION . KEYWORDS pLP1 SOURCE synthetic DNA construct ORGANISM synthetic DNA construct REFERENCE 1 (bases 1 to 8890) AUTHORS Invitrogen (Life Technologies) TITLE Direct Submission REFERENCE 2 (bases 1 to 8890) TITLE Direct Submission REFERENCE 3 (bases 1 to 8890) AUTHORS . TITLE Direct Submission COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article" COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article" FEATURES Location/Qualifiers source 1..8890 /mol_type="other DNA" /organism="synthetic DNA construct" enhancer 79..458 /note="CMV enhancer" /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer" promoter 459..662 /note="CMV promoter" /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early promoter" intron 796..1271 /label=beta-globin intron /note="internally truncated intron from human beta-globin" CDS 1355..2854 /label=HIV-1 gag /note="gag protein from human immunodeficiency virus 1" CDS 2650..5658 /label=HIV-1 pol /note="pol protein from human immunodeficiency virus 1" misc_feature 5686..5919 /label=RRE /note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the cytoplasm." polyA_signal 6150..6544 /label=beta-globin poly(A) /note="human beta-globin polyadenylation signal" rep_origin complement(7054..7642) /direction=LEFT /label=ori /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of replication" CDS complement(7816..8673) /label=AmpR /note="beta-lactamase" promoter complement(8674..8778) /label=AmpR promoter