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促溶标签GB1的蛋白序列及DNA编码序列

将外源基因转入大肠杆菌等宿主细胞中表达以获得相应的目的蛋白,是科研以及生产过程中获取所需蛋白质的重要方法之一。大肠杆菌作为蛋白表达的宿主细胞有很多优点:比如易于繁殖,蛋白表达量高且价格便宜。但是它也有很多局限性,例如:一些异源蛋白在大肠杆菌体内表达时表达量很低,一些蛋白表达后易于降解,或者表达的外源蛋白对宿主细胞具有毒性,导致细菌生长停滞或死亡。或者虽然表达量较高,但表达时蛋白尚未正确折叠便聚合在一起形成包涵体。对包涵体进行体外变复性实验使其重新折叠的方法不仅复杂,而且难以保证变复性后蛋白的结构与正常生理状态下一致。

选择合适的表达载体和宿主细胞,或优化表达温度和时间等方法可以使一些蛋白的表达情况得到改善,但很多时候仍然难以凑效。目前使用较为广泛的方法是利用具有促表达以及促溶作用的标签蛋白与目的蛋白融合表达。

有一些蛋白质在大肠杆菌中表达时表达量很高,而且能够正确折叠成可溶性蛋白,性质稳定,常被用作标签蛋白与目的蛋白融合在一起表达。此类标签蛋白被称为SETs(Solubility-Enhancing Tags),目前已发现了多种 SETs,例如 Trx,GST,MBP,NusA, SUMO,GB1 等等(Esposito,D. and D.K. Chatter jee (2006). " Enhancement of soluble protein expression through the use offusion tags. " Curr0pinBiotechnoll7 (4):353-358.)。

GB1蛋白标签的氨基酸序列如下:

MDTYKLILNGKTLKGETTTEAVDAATAEKVFKQYANDNGVDGEWTYDDATKTFTVTE

DNA编码序列为:

ATGGACACCTACAAACTGATCCTGAACGGTAAAACCCTGAAAGGTGAAACCACCACCGAA

GCTGTAGACGCTGCTACTGCAGAAAAAGTTTTCAAACAGTACGCTAACGACAACGGTGTC

GACGGTGAATGGACCTACGACGACGCTACCAAAACCTTCACGGTTACCGAA

或者

ATGGACACTTACAAATTAATCCTTAATGGTAAAACATTGAAAGGCGAAACAACTACTGAA

GCTGTTGATGCTGCTACTGCAGAAAAAGTCTTCAAACAATACGCTAACGACAACGGTGTT

GACGGTGAATGGACTTACGACGATGCGACTAAGACCTTTACAGTTACTGAA

Souce: 纽普生物    2017-06-04