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多功能融合标签——多聚精氨酸(R9)

将重组蛋白与阳离子多肽(如九聚精氨酸, R9)融合是一种将重组蛋白转入哺乳动物细胞内的方法。许多阳离子多肽具有穿透细胞的能力,这些多肽可以作为蛋白转导结构用于转运小分子药和大分子(如蛋白质)。尽管转运的具体机制还不是特别清楚,但是这些多肽自身携带的大量正电荷对穿透功能是至关重要的。可能是通过正电荷与细胞表面的阴离子分子(如硫酸肝素)的库伦作用完成的。研究表明,多肽的长度和阳离子多肽的组成对内化作用十分重要,一般认为7-9氨基酸是最优的,而且精氨酸由于赖氨酸。

与小分子不同,蛋白质的构象很脆弱,而且对功能至关重要,与九聚精氨酸的融合可能会对蛋白质的构象产生影响,进而影响蛋白质的功能。

20年前,人们用多聚精氨酸来纯化蛋白;再近一些,人们将带有6-精氨酸的GFP反相结合到云母片上;阳离子多肽也可以强烈的和塑料及玻璃表面进行结合。

R9融合标签对蛋白的一些影响有:

1)  提高融合蛋白的正电荷,增强他们与阳离子交换柱的结合能力。

2)  可能会影响蛋白质构象稳定性

3)  可以帮助蛋白质进入细胞内

4)  可能会增强蛋白的细胞毒性

5)  帮助蛋白质固定到玻璃或者云母片的表面。


Souce: 纽普生物    2016-07-17