纽普生物

小鼠单克隆抗体制备服务

服务简介

针对客户指定目的抗原(蛋白、多肽等)免疫小鼠,取其脾脏细胞,运用细胞融合技术制备杂交瘤细胞株和特异性针对该抗原的单克隆抗体。


服务内容

为降低顾客方实验风险,我们分二个阶段制备杂交瘤细胞株,顾客方分步付费。
第一阶段:免疫小鼠
(1) 设计实验方案。
(2) 准备实验动物:5只6-8周龄Balb/c小鼠。
(3) 动物免疫:每只Balb/c小鼠至少免疫3次,免疫后用ELISA测定其抗体效价。
(4) 验收标准:免疫后的小鼠血清与客户方提供的抗原样品有特异性结合,抗血清效价在1:10,000 以上。
顾客方认可后,进入第二阶段制备杂交瘤细胞株,否则服务终止。
第二阶段:分泌特异性抗体的杂交瘤株的建立
免疫小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合,通过抗原特异性ELISA筛选以及克隆化,最终提供2-3个培养上清ELISA检测对抗原识别OD值最高的杂交瘤克 隆,以及相应的杂交瘤克隆培养物(上清液或少量腹水),并附杂交瘤克隆建株过程的总结报告。

服务时间:全流程4-6个月。


客户需提供材料

顾客方需提供抗原样品,大于7mg,纯度大于90%(经SDS-PAGE检测)。若达不到要求的抗原顾客仍坚持启动项目,风险由顾客承担。


交付内容

最终提供:2-3株杂交瘤细胞株和少量腹水(或上清液),并给出相应的鉴定报告(包括以下内容:小鼠血清效价,杂交瘤的构建(融合率、阳性率)、杂交瘤的克隆化、杂交瘤培养上清液的抗体特异性检测与抗体亚型检测,以及杂交瘤诱生腹水的ELISA效价检测)。


交付标准

ELISA检测提供的杂交瘤培养物的腹水(或上清液)与顾客方提供的抗原样品有特异性结合,同时抗体特异性只针对客户方提供的抗原样品做出保证。

为了满足顾客的需要,增加服务的灵活度,我们还将单克隆抗体制备过程分解成单个服务,如下:

项目服务 服务简要内容
免疫小鼠 同时免疫5只BALB/C小鼠,并进行ELISA效价检测
融合 取一只小鼠的脾细胞融合,计算融合率和阳性率
融合后大规模检测 使用ELISA检测偶联抗原
使用ELISA检测蛋白抗原
阳性孔
克隆化
得到稳定分泌抗体的杂交瘤
分型 测定一杂交瘤的亚型
扩增及培养 杂交瘤扩增培养、冻存及效价检测
腹水制备 小鼠腹水诱生及效价检测(每株细胞株打2-3只小鼠,报价为单株的价格)
杂交瘤细胞株复苏 复苏及培养已经冻存的杂交瘤细胞株,附送50ml含血清培养基