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新型体外重组克隆方法,你了解了吗?

同传统的基于限制性内切酶和DNA连接酶的克隆方法相比,新型体外重组克隆具有不依赖限制酶切位点和实现无痕克隆以及多片段的同时组装的特点。新型体外重组克隆主要包括不依赖连接克隆(LIC)和一步等温反应克隆。 · 不依赖连接克隆 · 1不依赖连接克隆(LIC) 1990年,Charalampos Aslanidis和Pieter J.de Jong报道了一种不依赖于连接反应的克隆方法。其原理如图1所示: 图1 ...

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CNS多篇关注胚胎研究,要火的节奏!

Science&Cell:实时观测活细胞体内单个mRNA分子的翻译过程 学过中学生物的我们都知道分子生物学的中心法则,即DNA转录成RNA,RNA翻译成蛋白质,所有的这些逻辑过程都是根据实验结果进行推论并验证后成立的,然后,并没有亲眼所见。所谓眼见为实,有图才有真相。为此,研究者们一直试图尝试各种现代学手段观察到这一过程。 本期的Science和Cell在同一天分别刊登了来自四个不同实验室(其中就包括著名华人美女学者----哈佛大学庄小威),针对同一现...

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乳腺癌分子分型与个体化治疗指南

我们知道在乳腺癌治疗中上图事件常有发生:临床诊断一样,治疗一样,效果却背道而驰,这是为什么呢? 为了回答这个问题,我们从乳腺癌诊疗和效果深扒,首先我们来看一下乳腺癌分子分型的标准。 乳腺癌的分子分型标记物检测和判定(点击查看大图) 针对不同分型需要选择不同的治疗方案,抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范(2015版)对此作了推荐。 但...

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免疫荧光实验步骤

免疫荧光是标记免疫技术发展最早的一种,它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术,通过将抗体与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。免疫荧光步骤包括,细胞固定和通透,封闭,孵育一抗,二抗等。除了这些基本步骤,以下建议可以帮助您获得更好的实验结果。 1细胞固定和通透 为达到最佳的检测效果,细胞需要经过固定和通透。这些步骤非常关键,细胞和抗原需要保证最佳的结构,并利于抗体与抗原结合。通常情况下,需要通过以下步骤得以实...

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CNS多文关注HIV基因研究,CRISPR首次涉“艾”成功

在淋病、梅毒和艾滋三大性病中,前两者现在都已经有了有效的治疗手段。在经过及时的治疗之后,对病人的生活影响很小。而艾滋病由于目前在全世界范围内仍缺乏根治HIV感染的有效药物,因此现在主要的治疗目标只是:最大限度和持久的降低病毒载量、提高生活质量、降低死亡率,可以说是个不治之症。如今,结合CRISPR技术人类对于艾滋的治疗除了药物抗病毒以外,开始向更深层的基因治疗迈进。在本月的CNS期刊中,就有三篇关于HIV的文章,都是从基因的层面进行分析。 HIV包膜三维结构HD出炉 ...

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阴茎也能移植!阴茎癌是个什么鬼?

·导语·阴茎也可移植,本月初美国就出现了首例成功移植案例,而南非和中国之前也有相关报道。看来以后要是你敢对自己的命根子下刀,只要有适合的供体,换个尺寸也绝非难事。但是失去阴茎乃非人为可控,交通事故或者战场上都时有发生,更可怕的是还有阴茎癌这种生殖系统疾病威胁着广大的男性同胞。2014年,因为包皮环切手术失去阴茎的21岁南非患者接受了阴茎移植,并在手术六个月后成功让女友怀孕。2016年5月,位于波士顿的马萨诸塞州总医院外科医生,历经15小时手术,花费$50,000-$75,000,完成了美国第一例...

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ResearchGate: 检索、分享、同行互助一站搞定

·导语·小伙伴们想不想动态接受本领域内大牛发表的最新论文推送?今天麦子给大家介绍一个学术网站:ResearchGate,中文称呼为“研究之门”,除了文献检索,该网站还提供科学社交网络服务,一举帮你打通国际合作困难的壁垒。现在已有包括52名诺贝尔奖得主在内的900万名研究人员加入。闭门造车、单枪匹马已经不适应这个科技技术发展的时代了,协同合作、开源分享必将是未来大趋势。当我们在谈这个那个互联网模式的时候,科研的互联网模式将是未来的趋势。目前科研有互联网模式吗?有,ResearchGate无疑是先行...

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新型RNA-RNA互作用工具诞生

·导语·非编码RNAs(ncRNAs) 种类颇丰:rRNA、tRNA、snoRNA、miRNA、lncRNA······我们曾经相信,ncRNAs只是制造转录mRNA时没有作用的副产 品,然而逐渐发现了它们对基因调控的关键作用,或为其他蛋白质和RNA提供了一个支架,但对这些ncRNAs如何相互作用以及控制细胞功能所知甚少,偶尔 掀开了其裙角却发现它还穿着N条打底裤······对ncRNAs研究限制的最大因素是缺乏可以使用的RNAs互作方法,《Molecular Cell》上最新的一篇论文介绍了研...

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Science特刊:RNA的神奇世界

导语作 为生命体"中心法则"的枢纽,RNA分子不仅是基因表达的调控分子,而且具有调节蛋白质合成的潜力。因而,RNA分子作为一种治疗剂,成为科研界的新宠, 并不足为奇。总的来说,RNA正在改变我们对基因、基因表达和基因调控的思考方式。最近,Science发表的三篇综述为我们解密RNA神奇的世界。mRNA的表观修饰RNA的表观修饰大约包括100种,最近已有初步证据证实RNA的表观修饰,可促进mRNA在翻译与剪接中的作用,并为进一步了解mRNA修饰对细胞及发育调节因子的潜在影响奠定...

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